猪德尔塔冠状病毒(PDCoV)中和性单克隆抗体的构象表位特征及其治疗潜力研究

为解决猪德尔塔冠状病毒(PDCoV)跨物种传播及缺乏有效防治工具的问题，华南农业大学等团队通过杂交瘤技术生成靶向S蛋白的两种中和性单抗1C2和5H5。研究发现二者通过识别S1AB区构象表位阻断病毒受体结合，中和效价高达1:16,384，为PDCoV检测和被动免疫治疗提供新策略。论文发表于《Animal Diseases》，为防控人畜共患病提供重要工具。

　　冠状病毒家族中，猪德尔塔冠状病毒(PDCoV)近年来在全球猪群中引发严重腹泻疫情，更令人担忧的是其跨物种传播潜力——海地儿童感染病例的报道敲响了公共卫生警钟。这种病毒通过表面刺突蛋白(S蛋白)与宿主细胞受体结合实现感染，但现有防治手段匮乏。面对这一挑战，华南农业大学联合扬州大学等机构的研究团队在《Animal Diseases》发表重要成果，首次解析了两种高效中和单抗的作用机制，为PDCoV防控开辟新途径。

研究采用杂交瘤技术制备单抗，通过超速离心纯化病毒免疫BALB/c小鼠，结合流式细胞术筛选阳性克隆。关键实验包括：使用PDCoV感染LLC-PK1细胞模型进行中和试验，构建S蛋白截短体进行表位定位，并通过变性/非变性ELISA验证表位构象特性。

结果部分揭示三大发现：

1. 高效中和抗体特性：单抗1C2(IgG1)和5H5(IgG2b)能特异性识别天然S蛋白，在1:16,384稀释度下仍保持20%中和活性，流式检测显示其可阻断S1与猪氨基肽酶N(pAPN)受体结合。
2. 构象表位精确定位：通过系列S1截短体（S1A-S1D）表达，发现抗体仅结合S1AB连接区，Western blot显示5H5完全依赖天然构象，延长煮沸后1C2也丧失结合能力，证实为空间表位。
3. 跨物种防控潜力：表位位于受体结合域(RBD)邻近区，通过空间位阻抑制病毒入侵，这种机制不受宿主物种限制，为开发广谱治疗剂奠定基础。

讨论部分强调，这是首次阐明PDCoV S蛋白构象表位的中和机制。相比线性表位抗体，1C2/5H5对天然病毒颗粒显示更强亲和力，其靶向的S1AB区域在冠状病毒中高度保守，这为设计亚单位疫苗和抗体鸡尾酒疗法提供理论依据。作者特别指出，下一步将进行抗体人源化改造，以应对PDCoV潜在的人畜共患风险。

该研究不仅建立了PDCoV检测的标准化工具（已申请专利），更创新性地提出"构象表位阻断"治疗策略。鉴于PDCoV与SARS-CoV-2同属冠状病毒，其发现对应对未来新兴冠状病毒爆发具有前瞻性意义。正如研究者所言："这些抗体犹如精准的分子钥匙，既能锁定病毒入侵门户，也为解锁冠状病毒跨种传播机制提供了新线索。"