6-硫鸟嘌呤通过抑制BIRC3介导的自噬通路阻断肠道病毒71型复制的机制研究

本期推荐：南京大学医学院团队发现抗肿瘤药物6-硫鸟嘌呤(6-TG)可通过下调BIRC3表达抑制EV71诱导的完全自噬，其选择性指数(SI>2150.1)显著优于利巴韦林(>66.7)，为手足口病治疗提供了新策略。该研究揭示BIRC3是调控EV71非结构蛋白2Apro和3AB功能的关键宿主因子，相关成果发表于《BMC Microbiology》。

　　肠道病毒71型(EV71)是引发儿童手足口病(HFMD)的主要病原体，可导致严重神经系统并发症。尽管已有灭活疫苗，但其对非C4血清型保护有限，且临床仍缺乏特效抗病毒药物。6-硫鸟嘌呤(6-TG)作为FDA批准的抗白血病药物，近期被发现具有广谱抗病毒活性，但其抗EV71机制尚不明确。南京大学医学院陈德雁/吴稚伟团队在《BMC Microbiology》发表的研究，系统揭示了6-TG通过靶向宿主蛋白BIRC3调控自噬通路抑制EV71复制的新机制。

研究采用CCK8法测定细胞毒性，qPCR和Western blot分析病毒RNA/蛋白表达，ICW法检测VP1蛋白，TCID₅₀测定病毒滴度，免疫荧光观察自噬体形成，并结合siRNA干扰和质粒过表达技术验证BIRC3功能。通过时间梯度给药实验确定6-TG作用阶段，并利用自噬诱导剂雷帕霉素探讨自噬流完整性。

6-TG显著抑制EV71复制：在HT-29细胞中，6-TG的CC₅₀>2000μM而IC₅₀仅0.9302μM，选择性指数SI>2150.1，优于阳性对照利巴韦林(SI>66.7)。时间梯度实验显示6-TG主要在感染早期(2-12小时)发挥作用。机制研究发现：1）6-TG特异性下调BIRC3表达，而BIRC3敲除使EV71 mRNA降低60%，VP1蛋白减少70%；2）BIRC3过表达可逆转6-TG的抗病毒效果；3）BIRC3通过维持2A^pro蛋白酶活性和3AB蛋白稳定性促进病毒复制。

自噬调控分析表明：EV71感染诱导完全自噬表现为LC3-II/I比值升高和P62降解，而6-TG处理导致自噬体累积(LC3-II↑)且P62降解受阻，提示自噬流中断。BIRC3敲除重现该现象，证实其通过促进自噬体-溶酶体融合维持自噬流完整性。值得注意的是，6-TG单独处理即可升高LC3-II和P62水平，与雷帕霉素联用仍能阻断自噬流，表明其作用不依赖mTOR通路。

该研究首次阐明6-TG通过双重机制抗EV71：直接抑制BIRC3表达，间接阻断BIRC3依赖的自噬通路。BIRC3作为连接宿主自噬机器与病毒复制的关键节点，其抑制剂6-TG展现出优异的安全窗和抗病毒效力，为开发HFMD治疗药物提供了新靶点。未来需进一步探索6-TG调控BIRC3的表观遗传机制及在动物模型中的疗效，推动其临床转化应用。