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为解决肥厚性瘢痕（HS）治疗难题，研究人员开展了关于 fraxinellone（FRA）对 HS 作用的研究。结果发现 FRA 可诱导成纤维细胞铁死亡，抑制 HS 形成。这为 HS 治疗提供了新的潜在方案，有望改善患者生活质量。
在日常生活中，皮肤受伤后若愈合不当，就可能出现肥厚性瘢痕（Hypertrophic Scar，HS）。它不仅影响美观，还会带来皮肤功能障碍，让患者承受身体和心理的双重折磨。目前的治疗手段，像手术切除、注射皮质类固醇、压力和激光治疗等，都存在高复发率和有限疗效的问题，无法满足临床需求。在这样的背景下，探索新的治疗方法迫在眉睫。
上海交通大学医学院附属第九人民医院的研究人员开展了一项研究，该研究成果发表在《Biology Direct》上。研究发现，Fraxinellone（FRA）能够诱导成纤维细胞发生铁死亡（ferroptosis），进而抑制肥厚性瘢痕的形成，这为肥厚性瘢痕的治疗带来了新的希望。
研究人员在研究过程中运用了多种关键技术方法。细胞实验方面，通过细胞计数试剂盒 - 8（CCK - 8）、5 - 乙炔基 - 2` - 脱氧尿苷（EdU）增殖、伤口愈合、Transwell 等实验，评估 FRA 对人肥厚性瘢痕来源的成纤维细胞（HSFs）增殖和迁移能力的影响。分子生物学实验中，利用定量实时荧光定量聚合酶链式反应（qRT - PCR）、蛋白质免疫印迹（Western blot，WB）、免疫荧光染色等技术，检测相关基因和蛋白的表达水平。此外，还采用牛津纳米孔技术长读长 RNA 测序（ONT long - read RNA - seq）来揭示细胞内的基因变化，以及构建兔耳瘢痕模型进行体内实验验证。
下面来看具体的研究结果：
- FRA 抑制 HSFs 体外增殖和迁移：CCK - 8 实验显示 FRA 抑制 HSFs 生长，且呈剂量和时间依赖性，对正常皮肤来源的成纤维细胞（NDFs）增殖影响较小。EdU 增殖实验表明随着 FRA 剂量增加，EdU 阳性细胞百分比显著下降。伤口愈合和 Transwell 实验也证实 FRA 能明显抑制 HSFs 的迁移。
- FRA 影响 HSFs 体外胶原代谢和激活：FRA 下调 COL1A1、COL1A2 和 COL3A1 的 mRNA 表达，降低 COL 1 和 COL 3 的蛋白水平。同时，FRA 还调节基质金属蛋白酶（MMPs）及其抑制剂（TIMPs）的表达，抑制转化生长因子 - β1（TGF - β1）诱导的 α - 平滑肌肌动蛋白（α - SMA）表达增加，减弱 TGF - β1 诱导的 HSFs 收缩，表明 FRA 可影响 HSFs 的胶原代谢并抑制其激活。
- FRA 激活 HSFs 中的铁死亡：ONT long - read RNA - seq 分析发现，FRA 处理后的 HSFs 中，差异表达基因（DEGs）富集在 TGF - β 信号通路、Hippo 信号通路、细胞外基质（ECM） - 受体相互作用以及铁死亡相关通路。进一步实验验证了 FRA 可降低谷胱甘肽过氧化物酶 4（GPX4）蛋白水平，加速亚铁离子过载，促进脂质过氧化物和活性氧（ROS）积累，破坏线粒体结构和功能，从而诱导 HSFs 发生铁死亡。
- CTSB 是 FRA 诱导 HSFs 铁死亡的关键基因：通过 ONT long - read RNA - seq 识别转录本，发现 FRA 处理后，CTSB 转录本表达上调。分子对接研究表明 FRA 可与 CTSB 结合，促进其从溶酶体泄漏。后续实验证实，CTSB 可通过亚精胺 / 精胺 - N1 - 乙酰转移酶（SAT1）介导的脂质过氧化和丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号通路激活诱导铁死亡。
- FRA 通过铁死亡减轻体内 HS 形成：在兔耳 HS 模型中，FRA 处理可使瘢痕表面更平滑、颜色更浅，减少瘢痕组织厚度和胶原沉积。免疫组化结果显示，FRA 降低了 Ki - 67 阳性细胞数量、α - SMA 和 GPX4 表达水平，增加了 CTSB 表达，且这些效果可被铁死亡抑制剂 Fer - 1 逆转，表明 FRA 的治疗效果归因于 CTSB 介导的成纤维细胞铁死亡。
- CTSB 抑制减弱 FRA 对 HSFs 铁死亡的影响：使用 CTSB 特异性抑制剂 CA - 074 - me 处理后，FRA 诱导的 CTSB 从溶酶体泄漏、脂质过氧化、线粒体损伤和 MAPK 信号通路激活等效应均被逆转，同时 FRA 的抗纤维化作用也被削弱，说明 CTSB 在 FRA 诱导的 HSFs 铁死亡和抗纤维化过程中起重要作用。
综合研究结论和讨论部分，该研究首次证实 FRA 可通过诱导 HSFs 发生铁死亡来影响其胶原代谢等行为，进而抑制肥厚性瘢痕的形成。这一发现揭示了 FRA 抗纤维化的新机制，为肥厚性瘢痕的治疗提供了潜在的新型治疗药物和策略。不过，研究也存在一些局限性，如 CTSB 和 FRA 的具体靶点尚未明确，CTSB 与其他铁死亡生物标志物的相互作用也有待进一步研究。未来，研究人员将聚焦这些问题，进一步探索 FRA 的临床应用价值，有望为肥厚性瘢痕患者带来更有效的治疗方案。
