编辑推荐：
为探究撒哈拉以南非洲地区碳青霉烯耐药革兰阴性杆菌（CRGNB）的耐药机制，加纳研究人员开展了对 111 株 CRGNB 外膜蛋白（OMPs）的研究。结果发现，孔蛋白缺失是其耐药的主要机制之一。这为理解 CRGNB 耐药性提供新视角，对防控耐药菌传播意义重大。
在全球范围内，碳青霉烯耐药革兰阴性杆菌（CRGNB）已成为严重威胁公众健康的 “超级细菌”。它们就像隐藏在暗处的敌人，不断进化，对碳青霉烯类抗生素产生耐药性，导致感染患者的发病率、死亡率大幅上升，同时也让医疗成本急剧增加。在撒哈拉以南非洲地区，这个全球抗菌药物耐药（AMR）的重灾区，碳青霉烯耐药的问题日益严峻。然而，当地对于 CRGNB 耐药的分子机制研究却十分匮乏，多数相关研究仅仅停留在报告耐药率上，对于其耐药的深层原因知之甚少，尤其是外膜蛋白（OMPs，也称为孔蛋白，是革兰阴性杆菌细胞壁的重要组成部分，参与细菌多种生理过程，对维持细菌细胞膜完整性、促进细菌黏附、生物膜形成以及物质运输等至关重要，同时在耐药性的产生中也扮演着关键角色）在耐药中的作用，更是被严重忽视 。
为了填补这一研究空白，来自加纳大学健康科学学院的研究人员挺身而出，开展了一项意义重大的研究。他们从加纳四家主要医院收集的 3840 份临床标本中，筛选出 111 株 CRGNB，对这些菌株的外膜蛋白进行深入分析 。研究结果发表在《BMC Research Notes》上，为我们理解 CRGNB 的耐药机制提供了全新的视角。
研究人员在实验过程中主要运用了以下关键技术方法：首先，从临床标本中分离出 CRGNB 菌株；然后，针对不同菌属，采用两种改良方法分别提取外膜蛋白。对于肠杆菌科细菌和不动杆菌属，以及假单胞菌属，因结构差异采用不同操作。最后，通过十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）对提取的外膜蛋白进行分析，并与对照菌株对比 。
研究结果如下：
- 前期研究结果总结：在 111 株分离株中，多数对美罗培南（58%，n=64）、亚胺培南（66.7%，n=74）和多立培南（75%，n=83）耐药，且 58%（n=64）的分离株最低抑菌浓度（MIC）水平≥32mg/mL 。23.4%（n=26）的分离株经聚合酶链反应（PCR）检测为碳青霉烯酶阳性，不动杆菌属和铜绿假单胞菌中碳青霉烯酶基因的流行率最高。
- 孔蛋白表达情况：铜绿假单胞菌的 OMPs 中，OprD 表达量减少或完全缺失，仅 5.9%（3/51）的菌株有高水平的 OprD 。大部分孔蛋白缺失的菌株为碳青霉烯酶非 PCR 阳性。鲍曼不动杆菌中，96.8%（30/31）的菌株表达 OprF 缺失，包括 NDM-1 阳性菌株，同时观察到一株碳青霉烯酶非 PCR 阳性且孔蛋白高表达的菌株。在所有鲍曼不动杆菌分离株中，SDS-PAGE 分析显示主要条带约为 35kDa 。此外，许多菌株存在不相关的孔蛋白表达缺陷，如 OmpC/F 或 OmpK35/37 表达不足。大肠杆菌、产气克雷伯菌、肺炎克雷伯菌等肠杆菌科细菌的 SDS-PAGE 分析表明，与对照菌株相比，其 OmpC 和 OmpF 在 35kDa 和 37kDa 条带处缺失或显著减少。
研究结论和讨论部分指出，孔蛋白缺失是所研究分离株碳青霉烯耐药的主要潜在机制之一。在那些似乎不携带已知碳青霉烯耐药基因的耐药菌中，孔蛋白缺失可能就是其耐药的根本原因。例如，铜绿假单胞菌中 OprD 的减少或缺失，可能是其对碳青霉烯类抗生素耐药的重要机制，同时 β- 内酰胺酶等非质粒决定酶的存在也可能与耐药性相关。鲍曼不动杆菌 OprF 的缺失，同样暗示了其外膜低通透性孔蛋白减少。这些发现对于深入理解 CRGNB 的耐药机制具有重要意义，为后续开发新的抗菌策略提供了理论依据，有助于应对全球日益严重的抗菌药物耐药危机 。
