OsHMA3过表达比 OsNramp5 基因敲除更有效地降低水稻籽粒镉含量 —— 保障大米安全的新突破

【字体: 时间:2025年02月10日 来源:BMC Research Notes 2.8

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  为解决水稻易从稻田吸收镉(Cd)并在籽粒中积累,威胁消费者健康的问题,研究人员开展了比较 OsNramp5 基因敲除突变和 OsHMA3过表达降低水稻籽粒 Cd 含量效率的研究。结果表明,OsHMA3过表达更有效且不影响锰吸收,为培育低 Cd 水稻提供了指导。

  在我们的日常生活中,大米是超过 40% 世界人口的主食。然而,有一种看不见的 “危险分子” 正潜伏在大米中,那就是镉(Cd)。镉及其化合物对大多数生物体都具有高毒性,人体长期接触镉可能会引发癌症,还会对各个器官系统造成损害。而水稻偏偏对镉 “情有独钟”,它比其他作物更容易从稻田里吸收镉,并把这些镉积累在籽粒中,这让人们在享受大米带来的饱腹感时,也不知不觉地将镉摄入体内,健康受到严重威胁。
为了应对这一严峻问题,来自新加坡淡马锡生命科学实验室(Temasek Life Sciences Laboratory)以及新加坡国立大学生物科学系(Department of Biological Sciences, National University of Singapore)的研究人员展开了深入研究。他们聚焦于两个与镉吸收、转运和解毒密切相关的基因 ——OsNramp5 和 OsHMA3。OsNramp5 是水稻吸收镉和锰(Mn)的主要转运蛋白,而 OsHMA3是一种定位于液泡膜的转运蛋白,参与将镉转运到液泡中进行解毒。研究人员想弄清楚,到底是让 OsNramp5 基因 “罢工”(敲除突变),还是让 OsHMA3基因 “火力全开”(过表达),能更有效地降低水稻籽粒中的镉含量呢?这项研究成果发表在《BMC Research Notes》上,为解决水稻镉污染问题带来了新的曙光。

在研究过程中,研究人员主要运用了以下几种关键技术方法:首先是基因编辑技术,利用 CRISPR/Cas9 技术对 OsNramp5 基因进行敲除突变,精准地改变水稻的基因;其次是电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)技术,用于测定糙米中镉和锰的含量;最后是实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)技术,以此分析相关基因的表达水平 。

研究人员首先培育了 OsNramp5 基因敲除突变体,然后对其籽粒中的镉含量进行测定。结果发现,与野生型水稻 T5105 相比,这些敲除突变体籽粒中的镉含量显著降低。然而,与之前报道的 OsNramp5 突变体相比,它们籽粒中的镉含量仍然偏高。而且,敲除突变体籽粒中的锰含量也有所下降,不过由于土壤中锰的背景浓度较高,这种下降并没有对植株的生长发育产生明显影响。

接着,研究人员选取了具有代表性的 OsNramp5 突变株系 nramp5-L45 和之前研究中开发的 OsHMA3过表达株系 HMA3-L3 进行对比分析。结果显示,nramp5-L45 籽粒中的镉含量虽然低于 T5105,但仍高于国际食品法典委员会(Codex Alimentarius Commission)规定的大米中镉的最大限量(ML)。而 HMA3-L3 籽粒中的镉含量则远远低于限量标准,并且其锰含量与 T5105 相比没有明显差异,这表明 OsHMA3过表达不会影响水稻对锰的吸收。此外,研究人员将 nramp5-L45 的 OsNramp5 突变等位基因和 HMA3-L3 的 OsHMA3转基因整合到一个双纯合株系 NH 中,发现 NH 籽粒中的镉含量并没有比 HMA3-L3 进一步降低。

研究人员还对 OsNramp5 基因进行了深入探究。通过基因组测序发现,T5105 中的 OsNramp5 基因携带 II 型启动子,其表达水平低于携带 I 型启动子的水稻品种。qRT-PCR 分析也证实了这一点,这或许可以解释为什么在 T5105 中单一敲除 OsNramp5 基因只能部分抑制镉和锰的吸收。

研究结论和讨论部分意义重大。该研究明确了在降低水稻籽粒镉含量方面,OsHMA3过表达比 OsNramp5 基因敲除突变更有效,并且不会影响水稻对锰的吸收。这为通过基因工程培育低镉水稻提供了重要的理论依据和实践指导,有助于农民在镉污染的稻田中生产出更安全的大米,保障消费者的健康。不过,研究也存在一定的局限性,OsNramp5 对镉和锰吸收及转运的作用可能因水稻品种而异,未来还需要进一步研究这一结论在其他水稻品种中的适用性 。
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