编辑推荐：
子宫内膜癌治疗面临挑战，研究人员开展了以剪接因子 SNRPB 为主题的研究。结果发现 SNRPB 高表达促进癌细胞增殖转移，靶向抑制它可抑制肿瘤生长。该研究为子宫内膜癌治疗提供新靶点和策略。
在女性健康领域，子宫内膜癌是一个不容忽视的 “杀手”。在美国，2023 年有 66200 名女性新诊断为子宫内膜癌，13030 人因此失去生命；中国在 2015 年也有 69000 例新发病例和 16000 例死亡病例 。尽管早期子宫内膜癌临床预后较好，但复发或转移性患者治疗选择有限，生存率低。目前的治疗手段，如手术、放疗、化疗和孕激素治疗等，存在诸多局限性，比如渴望保留生育功能的女性无法接受子宫切除术，晚期或复发患者的激素治疗效果也不尽人意。因此，探寻新的分子生物标志物和潜在治疗靶点迫在眉睫。
肿瘤的发生发展与多种因素相关，其中 RNA 剪接异常在肿瘤进程中扮演着重要角色。剪接因子参与调控 RNA 剪接过程，其功能异常与肿瘤的发生、发展紧密相连。此前研究发现，多种剪接因子在肿瘤中发挥关键作用，如 SF3B1 在子宫内膜癌细胞中可促进增殖和侵袭。而剪接因子 SNRPB 在多种恶性肿瘤中高表达，与不良预后相关，但其在子宫内膜癌中的作用机制尚不清楚。
为了深入了解子宫内膜癌的发病机制，探寻新的治疗靶点，山东大学齐鲁医院的研究人员开展了一项关于剪接因子 SNRPB 与子宫内膜癌关系的研究，相关成果发表在《Experimental & Molecular Medicine》杂志上。
研究人员运用了多种关键技术方法。首先，通过生物信息学分析（如 GEPIA2、TBtools、DAVID 等工具）筛选差异表达基因、进行功能富集分析；利用组织样本（来自山东大学齐鲁医院的子宫内膜癌和正常子宫内膜组织）开展免疫组化染色实验；培养多种细胞系（Ishikawa、AN3CA、HEC-1A 等），进行 siRNA 转染、慢病毒感染等操作；还构建了裸鼠皮下异种移植模型和患者来源的异种移植（PDX）模型；运用 RNA 测序（RNA-seq）分析基因表达变化和可变剪接事件；采用 RNA 免疫沉淀（RIP）实验验证蛋白与 RNA 的相互作用 ；通过一系列细胞实验（如 MTT、克隆形成、EdU、细胞周期和凋亡、迁移和侵袭实验）评估细胞生物学行为。
下面来看具体的研究结果：
- SNRPB 是子宫内膜癌的关键驱动因子：研究人员通过生物信息学分析发现，与正常子宫内膜组织相比，10 种剪接因子在子宫内膜癌组织中高表达，其中包括 SNRPB。进一步通过 qPCR、western blotting 和免疫组化染色证实，SNRPB 在子宫内膜癌样本中显著高表达。生存分析显示，高表达的 SNRPB 与患者不良的总体生存（OS）和无复发生存相关，暗示其在子宫内膜癌进展中起关键作用。
- SNRPB 促进子宫内膜癌细胞的增殖和转移能力：在体外实验中，研究人员利用 siRNA 沉默 SNRPB 表达，发现 Ishikawa、AN3CA 和 HEC-1A 细胞的增殖能力明显受到抑制，表现为 MTT 实验中细胞生长速度减慢、克隆形成能力下降、EdU 实验中 DNA 复制细胞比例减少。同时，细胞周期停滞在 G1期，凋亡增加。相反，过表达 SNRPB 则促进 Ishikawa 细胞的生长和转移。这些结果表明，SNRPB 在体外能促进子宫内膜癌细胞的肿瘤发生能力。
- SNRPB 沉默抑制子宫内膜癌细胞在裸鼠体内的皮下成瘤能力：体内实验中，将转染了针对 SNRPB 的 shRNA（PLKO.1-shSNRPB）的 Ishikawa 细胞注射到裸鼠体内，与对照组相比，PLKO.1-shSNRPB 组的肿瘤体积和重量显著降低，且 Ki-67 表达减少，这表明 SNRPB 沉默可有效抑制肿瘤生长，降低癌细胞的增殖能力。
- miR-654-5p 低表达导致子宫内膜癌中 SNRPB 高表达：研究人员预测并验证了 miR-654-5p 可直接结合 SNRPB 的 3′- 非翻译区（3′-UTR），从而下调 SNRPB 的表达。过表达 miR-654-5p 可抑制子宫内膜癌细胞的增殖和集落形成能力，并且抵消 SNRPB 对癌细胞的促增殖作用。这说明 miR-654-5p 通过调控 SNRPB 表达，影响子宫内膜癌细胞的生物学行为。
- POLD1 是子宫内膜癌细胞中 SNRPB 的关键下游靶点：RNA-seq 分析发现，沉默 SNRPB 后，有 885 个差异表达基因（DEGs），其中 POLD1 是关键下游靶点之一。POLD1 在 DNA 复制和修复中起重要作用，与肿瘤的发生发展密切相关。沉默 SNRPB 可降低 POLD1 的表达，且二者在子宫内膜癌组织中的表达呈正相关。
- 高表达的 POLD1 与子宫内膜癌患者不良临床结局相关：研究发现，POLD1 突变与患者的无进展生存期（PFS）、疾病特异性生存期（DSS）和总体生存期（OS）呈正相关，而高表达的 POLD1 mRNA 与患者较差的 PFS、OS 和无复发生存期相关，表明 POLD1 高表达是子宫内膜癌不良预后的生物标志物。
- POLD1 敲低抑制子宫内膜癌的恶性行为：敲低 POLD1 可抑制 Ishikawa、AN3CA 和 HEC-1A 细胞的生长、集落形成、迁移和侵袭能力，使细胞周期停滞在 G1期并诱导凋亡。在 SNRPB 过表达的细胞中敲低 POLD1，可削弱 SNRPB 对细胞生长和集落形成的促进作用，表明 POLD1 在介导 SNRPB 的致癌功能中起关键作用。
- SNRPB 调节子宫内膜癌细胞中 POLD1 前体 mRNA 的内含子 22 保留：研究表明，SNRPB 可促进 POLD1 前体 mRNA 的有效剪接。沉默 SNRPB 会导致 POLD1 内含子 22 保留，产生提前终止密码子，使 POLD1 蛋白缺失与 PCNA 相互作用的位点，影响其酶活性。过表达全长 POLD1（POLD1-L）可促进癌细胞生长和集落形成，而过表达截短的 POLD1（POLD1-S）则抑制这些过程。
- ASO 介导的 SNRPB 沉默抑制子宫内膜癌细胞的增殖能力：设计并合成针对 SNRPB 的反义寡核苷酸（ASO），转染子宫内膜癌细胞后，发现其可显著降低 SNRPB 的 mRNA 和蛋白表达，抑制癌细胞的增殖和集落形成能力。在 CDX 和 PDX 模型中，ASO 介导的 SNRPB 抑制可显著减小肿瘤体积和重量，表明 ASO 可能是治疗子宫内膜癌的有效策略。
综上所述，该研究揭示了剪接因子 SNRPB 在子宫内膜癌中的致癌作用机制。SNRPB 通过调节 POLD1 的内含子保留，影响 POLD1 的表达和功能，进而促进子宫内膜癌的进展。低表达的 miR-654-5p 通过直接结合 SNRPB 的 3′-UTR，导致 SNRPB 高表达。靶向抑制 SNRPB 可有效抑制子宫内膜癌细胞的增殖和转移，为子宫内膜癌的治疗提供了新的潜在靶点和治疗策略。这一研究成果为子宫内膜癌的临床治疗带来了新的希望，有望推动相关领域的进一步研究和发展。
