疟疾胞外囊泡研究：从蛋白质组学洞察到自然感染转化的必要性

这篇综述系统总结了疟疾胞外囊泡（EVs）的研究进展，涵盖其生物发生（biogenesis）、分子组成（cargo）、病理生理学作用及临床转化潜力。文章通过蛋白质组学Meta分析揭示了体外（in vitro）与体内（in vivo）研究的显著差异，强调转向自然感染研究的重要性，并探讨了EVs作为新型生物标志物和疫苗载体的前景。

　　

生物发生、组成与摄取

疟原虫感染的宿主细胞和寄生虫本身分泌的胞外囊泡（EVs）在疾病进展中扮演关键角色。EVs分为外泌体（exosomes，30-150 nm）和微囊泡（microvesicles，100-1000 nm），其形成依赖ESCRT（endosomal sorting complexes required for transport）机制和脂质重排。研究发现，恶性疟原虫（P. falciparum）感染的红细胞（iRBCs）通过非经典分泌途径释放EVs，其中富含磷脂酰丝氨酸（PS）和鞘脂类（如神经酰胺），这些成分可能通过调节宿主免疫反应促进感染。

分子组成与Meta分析

蛋白质组学分析显示，EVs携带疟原虫入侵相关蛋白（如MSP-1、EBA-175）和宿主红细胞骨架蛋白（如血影蛋白、锚蛋白）。Meta分析对比6项体外研究，发现仅有少数蛋白（如磷酸甘油酸激酶）在多数研究中重复出现，而患者来源的EVs中仅16种疟原虫蛋白与体外结果重叠，凸显实验条件标准化和数据共享的紧迫性。此外，EVs还含有功能性RNA（如miRNA-451/140-Ago2复合物）和基因组DNA（gDNA），可通过调控宿主基因表达或激活STING通路加剧炎症。

细胞间通讯与病理机制

EVs通过以下途径加剧疟疾病理：

1. 免疫调节：iRBC-EVs递送miRNA-Ago2复合物至内皮细胞，破坏血管屏障并促进细胞因子释放。
2. 疾病严重化：脑疟（CM）患者内皮源性EVs水平升高6倍，与昏迷深度正相关；血小板EVs则与血栓形成和发热相关。
3. 隐蔽定植：间日疟原虫（P. vivax）EVs通过上调脾成纤维细胞ICAM-1，促进脾脏隐匿性感染灶形成。

转化应用

诊断标志物：CD106和miR-451a等EV成分在患者血浆中差异表达，与疾病严重程度相关。
疫苗开发：小鼠模型中，疟原虫EVs联合CpG佐剂可诱导记忆T细胞反应，提供85%的保护率。而PLGA包裹的EVs能延长抗原释放，增强免疫效果。

挑战与展望

当前研究存在三大缺口：

1. EV生物发生的分子开关未明确；
2. 体外与患者数据差异显著，需推进自然感染研究；
3. 分离方法缺乏标准化，需区分EVs与非EV颗粒（如血红蛋白降解产物）的作用。

未来需聚焦EVs在免疫逃逸和器官特异性损伤中的机制，以开发精准干预策略。