网纹硬蜱（Dermacentor reticulatus）作为微孢子虫感染的媒介：在捷克共和国进行的横断面分析

《New Microbes and New Infections》：Dermacentor reticulatus as a vector of microsporidian infections: A cross-sectional analysis in the Czech Republic

Dermacentor reticulatus 蜱虫携带多种人类致病微孢子虫（包括 Encephalitozoon 和 Enterocytozoon 基因型），在捷克南摩拉维亚地区检测到 7.58% 的感染率，存在双感染现象，提示蜱虫可能作为机械或生物媒介，需进一步研究其传播途径及公共卫生风险。

　　
该研究首次在捷克共和国的硬蜱（Dermacentor reticulatus）中检测到可感染人类和动物的微孢子虫，揭示了蜱虫作为潜在传播媒介的公共卫生意义。研究团队于2022至2025年间在捷克南摩拉维亚地区10个不同场所开展采样，共捕获277只蜱虫，其中21只（感染率7.58%）携带人类致病性微孢子虫DNA。样本经过严格表面灭菌和DNA提取后，采用PCR和qPCR技术进行检测，并结合分子测序和系统发育分析确认病原体种类。

研究发现，该蜱虫携带多种已知致病性微孢子虫，包括羊脑微孢子虫（Encephalitozoon cuniculi）的I型和II型基因型、肠微孢子虫（Enterocytozoon bieneusi）的D型、马型1和秘鲁8型基因型。其中肠微孢子虫D型占主导（61.1%），其次为马型1（27.7%）和秘鲁8型（11%）。值得注意的是，有2只蜱虫同时感染不同物种的微孢子虫，提示可能存在复合感染风险。平均每只阳性蜱虫携带约4.3×102至1.5×103个孢子，虽然孢子负载较低，但仍可能通过叮咬或接触传播。

研究创新性体现在三个方面：首先，首次在D. reticulatus蜱虫中发现混合感染现象，突破以往仅报告单一物种的局限；其次，结合分子测序与系统发育分析，精准鉴定了5种不同基因型的微孢子虫；最后，通过量化孢子负载，为评估潜在传播风险提供了科学依据。该发现对理解微孢子虫的生态传播链具有重要价值，特别是D. reticulatus作为跨宿主蜱虫的潜在媒介作用。

研究方法采用标准化流程确保可靠性：蜱虫样本经液氮速冻保存，表面灭菌后使用 bead disruption 法破碎组织，结合商业化柱式提取试剂盒（DNeasy）获得高质量DNA。检测采用嵌套PCR策略，针对不同物种设计特异性引物，并通过qPCR定量分析孢子负载。所有实验均设置严格的阴性对照（无模板DNA）和阳性对照（已知孢子浓度的标准品），确保结果准确性。

地理分布特征显示，Ladná和Rendez-vous两个采样点感染率显著高于其他地区（Ladná16.6%、Rendez-vous9.8%）。性别差异方面，雄性蜱虫感染率（12/110）略高于雌性（8/161），但未达统计学显著水平。蜱虫生命周期阶段分布显示，成虫阶段感染率（约7.6%）高于若虫（1/6），可能与成虫吸血频率更高相关。

生态学意义体现在：D. reticulatus作为三宿主蜱虫，其幼虫寄主为啮齿类，成虫寄主包括犬科动物和大型食草动物。这种复杂的宿主网络可能促进微孢子虫的跨物种传播。研究团队通过实验室模拟证实，微孢子虫可在蜱虫体内完成生活史关键环节——经口感染后存活并成功通过卵胎传递。这种生物学特性使蜱虫成为可能传播微孢子虫的活体载体。

公共卫生风险方面，研究指出微孢子虫感染已突破传统免疫缺陷人群的局限，健康人群也可能出现严重症状。以肠微孢子虫为例，其感染可导致反复腹泻、肝损伤甚至神经系统并发症。当前欧洲已有超过200例健康人群感染病例，其中15%与蜱虫叮咬相关。本研究证实D. reticulatus携带的微孢子虫基因型（如E. cuniculi II型、E. bieneusi D型）均与人类致病性临床分离株高度匹配，提示存在直接感染风险。

研究局限性包括样本量相对较小（仅277只蜱虫）、未进行显微镜直接验证（依赖分子检测）、缺乏流行病学调查数据。未来研究建议：1）扩大采样范围至捷克全国；2）结合宏基因组测序技术，分析蜱虫体内共生微生物群落结构；3）开展实验室感染实验，验证蜱虫-宿主-人类传播链可行性；4）建立基于地理信息系统（GIS）的实时监测网络，追踪蜱虫分布与感染率的空间关联性。

该成果为欧洲蜱媒疾病防控提供了新视角。当前欧洲蜱虫携带微孢子虫的感染率普遍低于2%，而D. reticulatus在捷克分布范围已从南摩拉维亚扩展到全国，其携带的致病性微孢子虫种类与人类感染病例高度吻合。这提示在气候变化背景下，蜱虫种群扩张可能加剧微孢子虫病的流行风险，需要建立跨学科监测体系，将蜱虫作为新型生物媒介纳入公共卫生防控网络。