早年经历中的轻微逆境会以性别差异的方式影响催产素能系统，从而导致成年雄性大鼠的亲密社交互动减少

neonatal Denial of Expected Reward（DER）导致成年雄性大鼠海马和边缘皮层OTR基因甲基化增加，OTR表达下降，引发社会互动缺陷，而雌性不受影响。内源性OT水平不变，但急性鼻内注射OT可改善雄性行为。该研究揭示早期生活压力通过性别特异性和脑区特异性表观遗传调控影响成年社会行为。

　　
该研究聚焦于早期生活压力对成年大鼠 oxytocinergic 系统的长期影响，特别是通过甲基化调控机制改变 oxytocin 受体（OTR）表达，最终导致社交行为异常。实验采用雄性大鼠模型，通过模拟母婴互动中断（Denial of Expected Reward, DER）这一温和的早期压力范式，系统性地探究了 DER 对成年后脑区 oxytocin 受体分布、甲基化水平及社交行为的影响。

### 研究背景与理论框架
oxytocinergic 系统在调节社会行为中起关键作用，其神经回路成熟较晚，对早期环境刺激尤为敏感。已有研究证实，早期母婴分离会导致成年后 oxytocin 水平下降及 OTR 表达减少，进而引发社交缺陷（Francis 等, 2000；Veenema, 2012）。然而，早期压力如何通过表观遗传机制（如 DNA 甲基化）特异性地影响 oxytocin 受体系统，仍存在知识空白。本研究通过构建 neonatal T- maze 训练模型，模拟母婴互动中断场景，系统评估了 DER 对成年雄性 rats 中缝杏仁核（MeA）、海马及眶额前皮层（MO PFC）的 oxytocin 受体网络重塑效应。

### 实验设计与关键发现
#### 1. 行为学验证
通过 two-choice 社交互动实验发现，雄性 DER 大鼠在 sniffing 指数（实际社交接触量）显著降低（p<0.001），而 social vigilance（社交警觉性）无统计学差异。这表明 DER 模型主要损害社交动机而非空间识别能力。值得注意的是，雌性大鼠未表现出类似行为改变，提示该效应具有性别特异性。

#### 2. OTR 表达与分布
免疫组化显示，雄性 DER 大鼠 MeA 的 OTR+ 细胞密度显著降低（p=0.001），但海马 CA1/CA3/CA4 亚区及 MO PFC 无统计学差异。这一发现提示早期压力可能通过 MeA 的特异性调控影响社交行为，而非广泛抑制 OTR 系统。

#### 3. 表观遗传学机制
Bisulfite NGS 检测发现，雄性 DER 大鼠 MeA 的 OTR 基因 proximal 启动子区出现 CpG 岛高甲基化，具体表现为 -65、-19 和 -11 三个位点的甲基化水平显著升高（均 p<0.019）。值得注意的是，海马及 MO PFC 的甲基化水平未受影响，进一步验证了脑区特异性。生物信息学分析显示，这些甲基化位点邻近转录因子结合位点（如 Adf-1 和 Sp1），提示甲基化可能通过干扰关键转录因子活性来抑制 OTR 表达。

#### 4. 生理功能验证
cFos 免疫荧光双标实验表明，雄性 DER 大鼠 MeA 的 cFos+/OTR+ 共表达神经元比例显著降低（p=0.003），提示神经元激活能力下降。同时，OT ELISA 检测显示 MeA 的 OT 水平未发生改变（CTR:124±7 pg/mg，DER:125±8 pg/mg），说明行为缺陷源于受体功能异常而非激素分泌不足。

#### 5. 治疗干预效果
急性鼻腔给予 oxytocin（1μg/μL）可显著提高雄性 DER 大鼠的 sniffing 指数（p=0.002），部分逆转行为缺陷。这表明外源性 oxytocin 可通过激活 MeA 的 OTR+ 神经元网络补偿内源性信号缺陷，为治疗早期压力相关社交障碍提供了潜在靶点。

### 理论创新与临床启示
1. **性别特异性机制**：首次证实雄性大鼠在 MeA 区域的 OTR 表达对早期压力高度敏感，而雌性受试者未出现类似变化。这可能与雄性大鼠在母婴互动中更依赖嗅觉信号（MeA 输出）的性别差异有关（Arakawa 等, 2010）。

2. **表观遗传调控网络**：揭示了 DER 模型通过 CpG 岛甲基化（?65、?19、?11）干扰 OTR 启动子活性，进而导致 MeA 神经元网络功能失调。该机制与人类自闭症谱系障碍中 OTR 甲基化异常（Gregory 等, 2009）及产后抑郁的神经生物学基础（Gouin 等, 2017）存在关联。

3. **行为-分子双轨验证**：通过行为学实验（social interaction）与分子生物学手段（OTR 免疫组化、cFos 激活标记、DNA 甲基化测序）的协同验证，首次完整建立“早期压力→MeA OTR 表达下降→社交动机减弱”的因果链。

### 研究局限与未来方向
1. **纵向研究缺失**：未跟踪发育关键期（如 PND21-28）对成年行为的持续影响，需开展纵向研究。

2. **表观遗传动态性**：仅检测成年期甲基化水平，未观察发育过程中甲基化动态变化，后续可通过时间点切片研究。

3. **多组学整合需求**：建议结合转录组（RNA-seq）和蛋白质组（OTR 信号通路蛋白）数据，全面解析 MeA 神经网络重构机制。

4. **人类转化应用**：需通过 fMRI 等技术验证人类 MeA 与社交行为的相关性，以及甲基化水平与临床表现的关联。

### 结论
本研究首次证实，通过限制母婴互动获得的温和早期压力（DER），可特异性诱导雄性大鼠 MeA 区域 OTR 基因启动子高甲基化，导致受体表达下降及神经元激活异常，最终表现为社交动机缺陷。急性 oxytocin 治疗可部分逆转该效应，提示 MeA OTR 系统是早期压力影响社交行为的关键靶点。这些发现为理解发育神经可塑性机制、开发基于 oxytocin 受体表观遗传调控的治疗策略提供了重要理论基础。