综述：海蛞蝓属Doto（异鳃类：裸鳃类）的系统修订——从地中海到南美洲

《Marine Biodiversity》：Systematic revision of the speciose sea slug genus Doto (Heterobranchia: Nudibranchia)???from the Mediterranean to South America

本文对海蛞蝓属Doto进行了全面的系统修订，通过整合分子系统发育（COI、16S rRNA、H3）、形态学和解剖学证据，揭示了该属的隐存多样性。研究证实了Doto millbayana与D. dunnei的同物异名关系（D. dunnei syn. nov.），并描述了来自地中海和智利巴塔哥尼亚的两个新种（D. cavernicola sp. nov.和D. vrenifossorum sp. nov.）。研究强调外部形态和体色在物种界定中的局限性，并突出了整合分类学在解析疑难类群中的重要性。

　　

系统修订的背景与挑战

海蛞蝓属Doto（异鳃类：裸鳃类）是裸鳃类中分类学最为复杂的属之一，这主要归因于其物种的隐存性、个体微小以及内外部特征的均一性。该属具有全球分布性，目前已记录92个有效物种，但其分类长期存在争议。传统上，物种的界定主要依赖外部特征，如体色、背侧附肢的数量和形态以及 rhinophore 鞘的形态。然而，这些特征表现出显著的种内变异和种间相似性，使得仅凭形态学进行准确鉴定变得十分困难。辐射齿带通常不被用于区分物种，而生殖系统则提供了重要的系统发育信息。此外，许多Doto物种专食特定的水螅虫类群，这也可能成为区分物种的辅助特征。

研究方法与样本策略

本研究采用了整合分类学的方法，结合了分子系统发育、形态学比较和生态学数据。样本采集覆盖了地中海、东北大西洋、南美洲（秘鲁、智利）和南极洲南设得兰群岛等多个地区。研究对171个标本（其中59个为新测序）进行了分析，涵盖了20个Doto物种。分子标记包括线粒体细胞色素c氧化酶亚基I（COI）、16S rRNA核糖体RNA（16S）和核基因组蛋白H3（H3）。系统发育分析采用最大似然法（ML）和贝叶斯推断（BI）。物种界定测试则使用了自动分区组装物种法（ASAP）和泊松树过程法（PTP）。此外，研究还提供了15个物种的详细外部形态、卵块形态、生态学和分布数据，并辅以活体照片和示意图。

分子系统发育的新见解

基于多基因联合数据集的系统发育分析将Doto物种分为几个主要支系。D. pinnatifida 位于系统树的基部位置。来自智利巴塔哥尼亚峡湾的未描述物种被确立为新种D. vrenifossorum sp. nov.，并获得了极高的支持率。

支系1包含了来自不同地理区域的物种。支系1A包括南极的D. antarctica、来自加那利群岛的D. fluctifraga和地中海的D. cervicenigra与D. pygmaea等。值得注意的是，D. fluctifraga和D. cervicenigra在外部形态上极为相似，均具有黑色色素沉着，但分子证据明确支持它们是不同的物种，其分布和食性（分别取食Pennaria disticha和Obelia/Campanularia等水螅虫）是关键的区分特征。支系1B则包括地中海的D. fragaria和D. rosea，以及来自秘鲁等地的几个未鉴定物种。

支系2主要由东北大西洋的物种组成，如D. tuberculata、D. fragilis、D. formosa和D. hystrix，其系统关系与先前研究一致，但仍需更多数据来厘清这些物种的界限。

支系3则聚焦于东北大西洋和地中海的物种。支系3A首次对D. verdicioi进行了分子测序，并确认了D. maculata在地中海西部的分布。D. paulinae和D. koenneckeri的有效性在ML分析和形态学差异上得到支持（如D. koenneckeri的背侧附肢结节具褐色逗点状斑点，而D. paulinae的结节除顶端外全为褐色），尽管BI分析的支持度不足。

支系3B包含了D. coronata物种复合体。分子证据明确显示，来自地中海和北大西洋的D. millbayana和D. dunnei的标本聚为一支，没有任何遗传分化。因此，研究建议将D. dunnei作为D. millbayana的次级同物异名（D. dunnei syn. nov.）。同时，研究证实地中海地区大量被鉴定为D. coronata和D. dunnei的标本实际上都属于D. millbayana，后者表现出广泛的形态和色型变异，包括背侧附肢结节的形状、体色斑点的分布和密度等，且其食性也呈现泛化特征。

地中海Doto物种的详细描述与新种发现

研究对地中海的Doto物种进行了详细的重新评估和描述。

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  Doto cavernicola sp. nov.：此新种发现于地中海加泰罗尼亚海岸的洞穴入口处。其身体具不规则红点，背侧附肢结节顶端具单红点，但附肢周围无斑点，口幕无色。其专食水螅虫Diphasia cf. delagei，卵块呈蜿蜒的绳索状。分子数据及其独特的生态位和生殖系统结构（如香肠状的壶腹、短而扁平的阴道）将其与形态相似的D. coronata区分开来。
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  Doto coronata的重新确认：研究确认了D. coronata在地中海的存在，但其分布比之前认为的要局限得多。一个地中海的D. coronata标本与来自其模式产地（荷兰）的标本聚在一起。该物种与D. millbayana的区别在于其每个结节通常只有一个斑点，且口幕有色。
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  其他地中海物种：研究还提供了D. cervicenigra（具黑色色素）、D. eireana（可能不分布于地中海，以往记录可能是D. maculata的误定）、D. floridicola（结节全为红褐色）、D. fragaria（结节白色，中心具黑点）、D. koenneckeri（结节伸长，具逗点状斑）、D. maculata（首次分子确认于地中海，体色和结节斑点变异大）、D. paulinae（结节除顶端外全褐）、D. pygmaea（背侧附肢不对称，常见于漂浮物上）和D. rosea（结节全白，色型多变）等物种的详细形态、生态和分布信息。

来自智利巴塔哥尼亚的新种：Doto vrenifossorum sp. nov.

本研究描述了第二个新种Doto vrenifossorum sp. nov.，它来自智利巴塔哥尼亚的峡湾。该物种身体呈白色至粉红色，体和头部侧面具成排的小突起，rhinophore鞘边缘呈叶状。背侧附肢可多达7-13对，结节呈瘤状，顶端白色。其辐射齿形态和生殖系统结构（如短卵圆形的阴茎、拉长囊状的受精囊）与南极物种D. carinova相似但有区别，结合其独特的地理分布和深度，支持其作为新种的成立。

结论与展望

本研究通过广泛的分子和形态学数据，显著推进了对海蛞蝓属Doto系统分类的理解。研究澄清了D. millbayana物种复合体的分类混乱，描述了新物种，并扩展了多个物种的已知分布范围。结果强调了整合分类学在解决隐存物种问题中的强大能力，特别是对于像Doto这样形态可塑性高、存在种间相似性的类群。未来研究需要进一步扩大样本覆盖范围，特别是热带印度-太平洋等研究薄弱区域，并纳入更多分子标记和更细致的形态学比较，以全面揭示Doto属的多样性及其演化历史。