揭示类风湿性关节炎中的环状RNA特征：新型生物标志物及其临床意义

《Journal of Inflammation Research》：Uncovering Circular RNA Signatures in Rheumatoid Arthritis: Novel Biomarkers and Clinical Implications

类风湿关节炎（RA）患者外周血单核细胞（PBMCs）中存在157个差异表达的circRNA，包括6个在独立队列中验证的upregulated circRNAs（hsa_circ_0001394、hsa_circ_0001998、hsa_circ_0009172、hsa_circ_0006732、circRNA2842、circRNA8330）。其中hsa_circ_0001394灵敏度达100%，hsa_circ_0001998特异度达100%，AUC值0.794-0.993，与RF、anti-CCP抗体及Wnt/钙/VEGF信号通路显著相关，提示circRNA可作为RA早期诊断的生物标志物及治疗靶点。

　　
该研究聚焦于类风湿性关节炎（RA）患者外周血单核细胞（PBMCs）中环RNA（circRNAs）的表达特征及其临床意义。研究采用双阶段设计，首先通过高通量RNA测序筛选出RA患者与健康对照（HCs）间差异表达的157个circRNA，其中91个上调，66个下调。随后通过独立队列的实时荧光定量PCR（RT-qPCR）验证，最终确定6个具有显著诊断价值的circRNA：hsa_circ_0001394、hsa_circ_0001998、hsa_circ_0009172、hsa_circ_0006732、circRNA2842和circRNA8330。这些circRNA的血浆或细胞质稳定特性使其成为理想的生物标志物候选。

在诊断性能方面，6个circRNA的受试者工作特征曲线下面积（AUC）介于0.794到0.993之间，其中hsa_circ_0001394以100%敏感性区分RA与HCs，而hsa_circ_0001998展现出100%特异性。值得注意的是，hsa_circ_0001998与血清学标志物中的类风湿因子（RF）呈正相关，而hsa_circ_0009172则与抗环 citrullinated肽抗体（anti-CCP）水平呈负相关。这种与临床指标的关联性提示circRNA可能通过调控炎症通路或免疫细胞功能参与RA病理过程。

功能分析显示，差异表达的circRNA显著富集于Wnt、钙信号和血管内皮生长因子（VEGF）等关键通路。其中Wnt信号通路与RA骨侵蚀密切相关，而钙信号通路通过NFAT（核因子激活T细胞）调控炎症因子分泌。VEGF通路的激活则可能促进滑膜血管新生和炎症扩散。值得注意的是，circRNA2842来源于PSTPIP2基因，该蛋白在调节巨噬细胞迁移和滑膜屏障功能中起重要作用。动物实验表明，PSTPIP2缺失会导致滑膜炎症加剧和骨侵蚀加速，提示circRNA2842可能通过类似机制发挥作用。

研究首次揭示了hsa_circ_0001394与肝癌的关系，其在RA中的异常表达可能通过竞争内源性RNA（ceRNA）机制影响泛素连接酶E2A（UBE2A）的表达，进而调控自噬体形成和炎症反应。此外，circRNA8330的发现具有特殊意义，其母基因NLRP12编码的蛋白在固有免疫中起双重调控作用：既抑制NF-κB信号通路，又通过激活炎症小体参与促炎反应。该研究证实NLRP12在RA中的表达异常与疾病活动度相关，这为开发靶向NLRP12的免疫调节疗法提供了新思路。

临床转化方面，研究构建了包含6个circRNA的联合诊断模型。初步数据显示，当AUC值超过0.85时，该模型对早期RA的敏感性和特异性分别达到93.8%和96.2%。这显著优于传统RF和anti-CCP检测（AUC约0.85和0.95），尤其在血清学阴性的患者中，circRNA组合诊断的特异性提升至98.7%。但研究也指出当前样本量较小（n=35），且仅针对中国人群，未来需扩大样本量和种族多样性验证。

机制探索部分，研究团队发现hsa_circ_0001998通过miR-145轴调控炎症小体活性，而hsa_circ_0009172可能通过DNA修复通路影响抗原呈递细胞功能。这些发现与既往关于circRNA作为ceRNA调控免疫反应的研究相呼应，但首次在RA中揭示了circRNA介导的DNA甲基化修饰（如DNA2基因甲基化）与疾病活动度的相关性。研究建议后续通过单细胞测序技术解析circRNA在PBMCs亚群中的表达异质性，以及其在滑膜成纤维细胞中的具体作用机制。

该研究还存在若干局限性：首先，样本采集时间点单一（均为疾病早期），未能覆盖不同病程阶段的动态变化；其次，未检测circRNA在关节滑液或成骨细胞中的表达差异；再者，尚未建立circRNA与已知生物标志物的联合诊断阈值。建议后续开展多中心队列研究，结合液体活检技术探索circRNA的时空表达规律，并建立标准化检测流程。

在转化医学方面，研究为开发新型生物标志物检测方法提供了理论依据。例如，利用hsa_circ_0001394的高灵敏度特性（AUC=0.993）可建立早期筛查体系，而hsa_circ_0001998的特异性优势（AUC=0.993）则适合用于鉴别诊断。此外，研究发现的circRNA2842与PSTPIP2蛋白的调控关系，提示靶向PSTPIP2-CircRNA2842轴可能通过抑制巨噬细胞浸润和滑膜过度增殖实现治疗干预。

该成果不仅扩展了circRNA在自身免疫性疾病中的研究范畴，更通过多组学整合分析揭示了RA免疫异常的分子网络。特别是发现circRNA8330与NLRP12蛋白的免疫调控双功能特性，为理解RA中炎症与抗炎机制的动态平衡提供了新视角。这些发现为开发基于circRNA的分子诊断工具和免疫调节疗法奠定了重要基础，有望推动RA的早期精准诊断和治疗模式革新。