肠道菌群宏基因组特征揭示不宁腿综合征的病理新机制

《Sleep》：Analysis of gut microbiota in Restless Legs Syndrome: searching for a metagenomic signature

本研究针对不宁腿综合征（RLS）与肠道菌群的关联尚不明确的现状，通过16S rRNA测序技术对比RLS患者、失眠患者及健康人群的粪便微生物组成。结果发现RLS患者肠道中Lachnoclostridium和Flavonifractor菌属显著减少，且其丰度与病程及运动表型相关，首次揭示了RLS特异的宏基因组特征，为脑-肠-微生物轴在RLS发病中的作用提供了新证据，有望推动微生物靶向治疗策略的开发。

　　

不宁腿综合征（Restless Legs Syndrome, RLS）是一种常见的神经系统疾病，患者常在静息状态（尤其是夜间）出现难以抑制的下肢移动冲动，伴随感觉异常，严重影响睡眠质量和生活质量。尽管RLS的全球患病率高达10%，其病理机制至今未完全阐明。传统研究多聚焦于铁代谢异常和多巴胺系统功能障碍，但近年来，炎症和免疫调节异常逐渐被视为关键因素。更引人注目的是，肠道菌群通过脑-肠-微生物轴（Brain-Gut-Microbiome Axis, BGM）与中枢神经系统双向互动，可能参与RLS的发病过程。然而，此前仅有两项小规模研究提示RLS与小肠细菌过度生长（SIBO）相关，缺乏对肠道菌群整体特征的系统性分析。

为填补这一空白，意大利博洛尼亚大学神经科学研究所的Angelica Montini等人在《Sleep》期刊发表研究，首次通过宏基因组学方法全面描绘RLS患者的肠道菌群图谱。研究团队招募了37名RLS患者、31名慢性失眠（INS）患者及33名健康对照（CTRL），采集粪便样本进行16S rRNA基因测序，并结合临床症状量表（如IRLS、PSQI）评估菌群与疾病表型的关联。

关键技术方法概述

研究采用Illumina MiSeq平台对16S rRNA基因V3-V4区进行扩增子测序，通过DADA2流程处理原始数据生成扩增子序列变异（ASV），并利用DESeq2和ALDEx2进行差异菌群分析，校正年龄、性别、BMI等混杂因素。功能预测通过PICRUSt2完成。

研究结果

1. 1.
   菌群多样性特征
   Alpha多样性分析显示，RLS患者的Shannon指数较健康对照有升高趋势，且病程≥15年的患者多样性显著更高（p<0.05）。Beta多样性分析进一步表明，病程长短显著影响菌群结构（Bray-Curtis距离，q=0.039）。
2. 2.
   特异性菌属改变
   
   与健康对照相比，RLS患者肠道中Lachnoclostridium（q=0.005）和Flavonifractor（q=0.027）菌属丰度显著降低，且这一变化在RLS与失眠患者的对比中同样存在，而失眠患者与健康对照无差异。此外，Bacteroides、Eisenbergiella等菌属也呈现下降趋势。
3. 3.
   菌群与临床参数关联
   Clostridium sensu stricto 1与IRLS评分负相关（q<0.001），而Faecalibacterium与PSQI评分正相关（q=0.008）。值得注意的是，Lachnoclostridium的减少在病程长、纯运动表型患者中更为明显。
4. 4.
   功能预测与炎症机制
   虽未发现显著富集的功能通路，但研究指出Lachnoclostridium等菌属可通过产生短链脂肪酸（SCFAs）调节肠道屏障功能与系统性炎症，进而影响铁代谢关键激素hepcidin的表达，这可能是RLS中铁缺乏与炎症共存的潜在机制。

结论与意义

本研究首次揭示RLS患者存在独特的肠道菌群特征，其特征性菌属变化与病程严重程度及表型相关，且独立于失眠等共病。结果支持肠道菌群失调可能通过SCFAs-炎症-铁代谢轴参与RLS病理过程，为未来开发微生物干预策略（如益生菌或饮食调节）提供了理论依据。尽管样本量和小族单一性仍是局限，但多对照组设计和严谨的统计校正增强了结论的可靠性。后续研究需整合代谢组学与炎症标志物数据，进一步明确菌群-宿主互作的具体机制。