HSPA8通过分子伴侣介导的自噬(CMA)调控鼻咽癌细胞恶性生物学行为的机制研究

《Scientific Reports》：Effect of HSPA 8 on the biological function of NPC cells and its mechanism

本研究聚焦鼻咽癌(NPC)治疗难题，通过构建HSPA8基因过表达/沉默模型，发现HSPA8高表达可促进NPC细胞增殖、迁移、侵袭并抑制凋亡，其沉默可诱导G2/M期阻滞。RNA-seq分析提示HSPA8可能通过p53/VEGF通路调控分子伴侣介导的自噬(CMA)。该研究为NPC提供了新的预后标志物和治疗靶点。

　　

在头颈肿瘤领域，鼻咽癌(Nasopharyngeal Carcinoma, NPC)因其隐匿的发病位置和高度侵袭性特征，始终是临床治疗的难点。尤其在中国及东南亚地区，其发病率占全球总病例的80%，且多数患者确诊时已进展至晚期，常面临传统放化疗后局部复发和远处转移的困境。这一严峻现状迫切要求科学家从分子层面寻找新的预后标志物和治疗靶点。

热休克蛋白A8(HSPA8)作为HSP70家族中结构性表达的分子伴侣，近年来在多种癌症中被发现异常高表达，但其在NPC中的具体作用机制尚不明确。发表于《Scientific Reports》的最新研究首次系统揭示了HSPA8通过调控分子伴侣介导的自噬(Chaperone-Mediated Autophagy, CMA)影响NPC恶性进展的生物学机制。

研究团队采用定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)技术，率先证实HSPA8在NPC细胞系(5-8F、HK1)中的mRNA表达水平显著高于正常鼻咽上皮细胞NP69。为深入解析其功能，通过慢病毒转染技术成功构建HSPA8稳定过表达及基因沉默的NPC细胞模型，并利用CCK-8法、细胞划痕实验、Transwell小室实验等经典功能学方法进行验证。

HSPA8促进NPC细胞增殖、迁移和侵袭

细胞划痕实验显示，沉默HSPA8可显著降低细胞伤口愈合率(p<0.05)，而过表达则产生相反效应。Transwell迁移实验进一步证实，沉默HSPA8使穿越微孔膜的细胞数锐减(p<0.01)，而过表达组细胞迁移能力增强(p<0.001)。CCK-8增殖曲线表明，HSPA8沉默组OD₄₅₀值随时间推移显著低于对照组，而过表达组增殖活性增强。在侵袭能力方面，基质胶包被的Transwell实验显示，HSPA8沉默使侵袭细胞数减少(p<0.05)，而过表达促进侵袭。

HSPA8影响NPC细胞凋亡和周期进程

流式细胞术检测发现，沉默HSPA8使5-8F和HK1细胞凋亡率显著升高(p<0.05)，而过表达抑制凋亡。细胞周期分析提示，HSPA8沉默引起G₂/M期阻滞，这可能通过激活细胞周期检查点调控机制抑制肿瘤增殖。

转录组测序揭示CMA相关机制

对HSPA8沉默的5-8F细胞进行RNA-seq分析，共鉴定1393个差异表达基因(DEGs)，其中上调1028个，下调365个。KEGG富集分析显示DEGs显著富集于p53信号通路和VEGF信号通路等CMA相关通路。通过GSEA数据库筛选出478个CMA靶标基因，与DEGs取交集获得39个共同基因，提示HSPA8可能通过调控CMA影响NPC进展。

本研究首次证实HSPA8作为癌基因在NPC中通过CMA通路调控细胞恶性表型，不仅为NPC靶向治疗提供新思路，更创新性地将HSPA8与EBV感染背景下的肿瘤微环境关联。后续研究需在动物模型和临床样本中验证HSPA8介导CMA的具体分子机制，并探索其与EBV协同致癌的潜在价值。