离子对工程化纳米组装体协同整合I/II型免疫原性细胞死亡实现化疗-光疗-免疫治疗新策略

《Cell Reports Physical Science》：Ion-pair-engineered nanoassemblies for synergistic integration of type I and II immunogenic cell death and chemo-photo-immunotherapy

本研究针对肿瘤免疫原性低导致的免疫治疗响应率低问题，开发了离子对工程化纳米组装体（H-M NAs），共装载I型ICD诱导剂米托蒽醌（MTO）和II型ICD诱导剂金丝桃素（HY）。通过协同激活内质网应激通路，显著增强DAMPs释放和T细胞浸润，在CT26荷瘤小鼠模型中实现高效抑瘤效果，为冷肿瘤免疫治疗提供了新范式。

　　

癌症免疫治疗虽然革命性地改变了肿瘤治疗格局，但临床响应率仅10%-30%，其核心瓶颈在于"冷肿瘤"的低免疫原性特征。免疫原性细胞死亡（ICD）通过同时提供肿瘤抗原性和佐剂性，成为激活抗肿瘤免疫的关键策略。然而，传统单一类型的ICD诱导策略存在局限性：I型诱导剂（如化疗药米托蒽醌MTO）通过"脱靶"效应间接引发内质网（ER）应激，II型诱导剂（如光敏剂金丝桃素HY）则直接靶向ER应激通路，两者单独使用难以充分激活免疫应答。

针对这一挑战，沈阳药科大学张敬萱等研究人员在《Cell Reports Physical Science》发表研究，创新性地构建了离子对工程化纳米组装体（H-M NAs），首次实现了I/II型ICD诱导剂的协同整合。该研究通过巧妙的分子设计，将亲水性MTO（logP=-3.1）与疏水性HY（logP=6.9）通过胆固醇硫酸钠（SCS）介导的离子对作用共组装，解决了理化性质差异大的药物共递送难题。

研究团队采用纳米沉淀技术构建H-M NAs，通过动态光散射、透射电镜等技术表征纳米颗粒性质，利用MTT法评估协同毒性，通过共聚焦显微镜观察细胞摄取和ICD标志物（CRT、HMGB1）表达，并在CT26荷瘤小鼠模型上验证抗肿瘤效果及免疫激活机制。

协同剂量比的确定

通过Chou-Talalay法计算联合指数（CI），发现HY与MTO在1:5摩尔比时协同效果最佳（CI<1）。在该比例下制备的H-M NAs粒径约110nm，zeta电位-40mV，封装效率>97%，显著改善了药物的血液循环时间和肿瘤靶向性。

纳米组装体的表征

H-M NAs在血清中表现出良好的胶体稳定性，释放实验显示48小时内MTO累积释放约80%。与物理混合物（H-M Sol）相比，纳米制剂显著促进细胞摄取，4小时达到峰值，为光疗时间点选择提供了依据。

体外ICD效应评估

共聚焦显微镜结果显示，H-M NAs+激光处理组CRT膜易位显著增强，HMGB1核内含量明显降低，表明I/II型ICD诱导剂的协同作用显著放大了DAMPs释放。

体内抗肿瘤效果

在CT26荷瘤小鼠模型中，H-M NAs+激光组肿瘤抑制率最高，肿瘤浸润CD4⁺/CD8⁺T细胞显著增加，Tregs明显减少。免疫组化证实该组CRT表达水平最高，体现了强大的ICD激活能力。

该研究的重要意义在于首次通过纳米技术实现了I/II型ICD诱导剂的精准协同，突破了单一ICD诱导策略的局限。离子对工程化策略为理化性质差异大的药物共递送提供了新思路，而化疗-光疗-免疫治疗的多元协同模式为冷肿瘤的免疫治疗转化提供了有前景的策略。