在患有Hennekam淋巴管扩张-淋巴水肿综合征3型的成年患者中发现了ADAMTS3基因的双等位基因剪接和缺失变异

《BMJ Connections Clinical Genetics and Genomics》：Novel biallelic splicing and deletion variants of ADAMTS3 found in adult patients with Hennekam lymphangiectasia-lymphedema syndrome 3

Hennekam淋巴管 ectasia-淋巴水肿综合征（HKLLS）成人患者首次发现ADAMTS3基因双杂合变异，包括308 kb大删除和IVS9+5G>T剪接变异，导致VEGFC成熟障碍及淋巴管形成异常。

　　
Hennekamp淋巴管 ectasia-淋巴水肿综合征（HKLLS）是一种由ADAMTS3基因突变引发的常染色体隐性遗传病。该疾病以先天性淋巴水肿、淋巴管扩张和特殊面部表现为特征，并伴随智力障碍等神经发育问题。近年来，研究主要聚焦于ADAMTS3基因的编码区突变，但关于剪接位点的致病性变异尚未见报道。2023年发表于《英国医学杂志》的研究首次揭示了ADAMTS3基因剪接异常与HKLLS的关联，并发现该疾病在成人群体中的新表现。

一、病例特征与遗传检测
研究团队对两位成年日本姐妹（40岁和30岁）进行系统分析。患者表现为进行性下肢水肿，伴有短 stature（身高低于正常值3-5个标准差）。生育过程中均出现腹膜腔淋巴囊肿，新生儿体重正常但需警惕潜在淋巴管病变风险。值得注意的是，这两位患者均未出现已报道的HKLLS典型特征——上肢水肿或面部发育异常，提示可能存在表型异质性。

通过全外显子测序结合SNP微阵列分析，研究者发现两个关键致病突变：首先检测到位于4号染色体长臂的308 kb大片段缺失，涵盖ADAMTS3基因外显子1-3及启动子区域。该缺失导致基因表达框架破坏，使该区域无法产生正常蛋白。其次在剪接位点IVS9+5处发现G-T单核苷酸替换突变（c.1352+5G>T），该变异位于外显子9与内含子10的交界区域。

二、分子机制验证
研究团队通过多维度实验验证突变致病性。在 lymphoblastoid细胞系中，发现患者存在异常剪接模式：约88%的mRNA转录物携带111 nt的缺失，该缺失导致关键催化结构域（第133-191氨基酸位）的移码。质谱分析显示，截短的ADAMTS3蛋白（长度较正常减少37个氨基酸）无法有效激活VEGFC蛋白的成熟过程。

值得注意的是，患者携带复合杂合突变（大片段缺失+剪接突变）。这种双重破坏机制导致约73%的ADAMTS3蛋白完全失活，而剩余功能性蛋白则因翻译提前终止显著减少。通过构建minigene模型，研究者观察到突变体在内含子剪接时出现多重异常：除主要111 nt缺失外，还检测到23-27 nt的异常外显子延伸和68 nt的截短转录本。

三、功能实验与临床关联
Pro-VEGFC处理实验显示，野生型ADAMTS3可将未成熟VEGFC切割为成熟形式（切割位点位于第383氨基酸残基），而突变体无法完成该关键步骤。Western blot检测证实，患者细胞培养液中VEGFC成熟产物浓度较对照组下降82-95%。这种功能丧失与淋巴管形成障碍直接相关，因VEGFC成熟是淋巴管内皮细胞迁移的关键信号。

临床观察发现，突变体携带者的淋巴水肿程度与基因突变负荷呈正相关。尽管患者未出现上肢水肿，但长期下肢水肿导致髋关节退行性病变（患者1）和肠道淋巴囊肿（患者2）。值得注意的是，母亲携带相同的大片段缺失（杂合状态），但未表现出临床症状，提示可能存在表观遗传调控差异或补偿机制。

四、临床诊断意义
研究首次将ADAMTS3基因分析纳入成人淋巴水肿的诊疗流程。对于合并以下特征的成人患者应优先考虑ADAMTS3致病突变：①特发性进行性下肢水肿伴生育期腹腔淋巴囊肿 ②短 stature与正常智能的矛盾表现 ③家族中有类似病例。检测建议采用捕获式测序联合Sanger测序，重点关注外显子1-3及IVS9+5区域的变异。

五、治疗前景与研究方向
目前研究证实ADAMTS3功能缺失是淋巴管形成障碍的核心机制。基于VEGFC信号通路的研究提示，外源性VEGFC可能部分补偿ADAMTS3缺陷，但需注意血管生成异常可能带来的血栓风险。未来研究可聚焦以下方向：
1. 建立ADAMTS3剪接异常的动物模型
2. 开发基于CRISPR的基因编辑治疗新方案
3. 探索其他淋巴管相关基因（如VEGFCR3）的修饰作用
4. 建立新生儿淋巴水肿的早期筛查体系

该研究突破传统认知，将ADAMTS3检测纳入淋巴水肿的分子诊断谱系。临床实践中，对于存在复合杂合突变的成人患者，建议进行以下评估：①淋巴管造影检测隐性水肿 ②营养性水肿与遗传性淋巴水肿的鉴别诊断 ③生育风险评估及胎儿监测。这些发现为遗传性淋巴水肿的分子分型提供了新依据，并提示在新生儿筛查中纳入ADAMTS3基因检测可能具有早期干预价值。