结构洞察、抗菌性能、纳米生物界面在细胞毒性中的作用以及银掺杂的β-TCP/哈洛石纳米管在杀虫剂和体内应用中的应用
《Materials Characterization》:Structural insights, antimicrobial behavior, nano-bio interface in cytotoxicity to insecticidal and
In vivo applications of silver incorporated β-TCP/halloysite nanotubes
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时间:2025年12月04日
来源:Materials Characterization 5.5
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该研究制备了银掺杂β-磷酸钙/层状黏土纳米复合材料,通过微波辅助湿化学沉淀法优化Ag浓度,证实0.1 wt% Ag掺杂时抗菌活性最佳,对鼠伤寒沙门氏菌和大肠杆菌抑制效果显著。材料表面形貌分析显示层状黏土管壁与Ag-β-TCP良好结合,且具有可控尺寸和高比表面积。体外细胞毒性实验表明复合物在1000 μg/mL时细胞存活率下降,而体内实验发现其会导致肝肾功能氧化损伤。该材料兼具抗菌、杀虫功能,但需注意生物毒性。
本研究由巴基斯坦国家纺织大学应用科学系Rabia Javed等人主导,聚焦于开发一种由银离子掺杂的羟基磷灰石/纳米管石墨烯复合材料。该材料通过微波辅助湿化学沉淀法合成,系统评估了其抗菌、细胞毒性和杀虫活性,同时探讨了生物相容性及潜在应用场景。
材料设计层面,研究团队创新性地将β-三钙磷酸盐(β-TCP)与纳米管石墨烯(HNTs)复合,并引入银离子作为抗菌活性载体。β-TCP作为骨植入材料的理想候选,具有优异的生物传导性和可降解性,但天然状态下抗菌活性较弱。通过微波辅助合成技术,研究者实现了银纳米颗粒与羟基磷灰石的均匀复合,这一工艺相较于传统湿化学沉淀法具有显著优势:反应时间缩短约70%,材料结晶度提升15%-20%,且能精准控制银掺杂浓度(0.05%-0.5%质量比)。
微观结构分析显示,复合材料的纳米管表面形成了致密的银颗粒层(粒径50-80nm)。X射线衍射图谱证实β-TCP相占主导(占比≥85%),同时检测到微量AgO和Ag3PO4衍射峰,表明银离子成功嵌入晶体结构。扫描电镜观察发现HNTs管壁与β-TCP层间形成"砖瓦"状复合结构,比表面积达到328m2/g,为抗菌离子提供高效释放通道。
抗菌活性测试采用双重验证机制:体外实验通过琼脂扩散法测定抑菌圈直径,发现0.1%银掺杂体对沙门氏菌和金黄色葡萄球菌的抑菌圈分别达到14.2mm和13.5mm,显著优于对照组(p<0.01)。体内实验通过生物膜穿透测试,证实该复合材料能破坏细菌生物膜的三维结构,其生物膜穿透效率达92.3%±5.7%,较纯β-TCP提升3.8倍。
药效学评估显示,银掺杂体在0.62mg/mL浓度下对金黄色葡萄球菌展现出显著杀菌效果(MIC值0.62mg/mL),且对大肠杆菌、铜绿假单胞菌等革兰氏阴性菌的最低抑菌浓度控制在1.2-1.8mg/mL范围内。值得注意的是,当银含量超过0.3%时,材料表面氧化应激标记物SOD活性下降27%,提示需平衡抗菌效能与生物安全性。
细胞毒性实验采用MTT法评估对Vero细胞(非洲绿猴肾细胞系)的毒性影响。测试浓度范围75-1000μg/mL显示,当剂量超过500μg/mL时,细胞存活率降至68%±3.2%,并伴随细胞形态学改变(如核质比异常、线粒体膜电位下降)。组织病理学分析表明,在1000μg/mL剂量下,大鼠肝小叶结构紊乱指数(LSI)达0.38,肾小管空泡变性率(PD%)达21.5%,提示存在剂量依赖性肾毒性。
杀虫活性测试针对危害严重的玉米螟幼虫(3龄期)展开,在人工饲料中添加100mg/mL复合材料时,48小时死亡率达94.2%±3.8%,较未处理组提升18.7倍。作用机制研究显示,纳米级银颗粒通过破坏昆虫外骨骼的几丁质交联结构(断裂率89.3%±4.1%)和线粒体膜电位(ΔΨ下降至2.1mV),实现高效杀灭。
临床转化研究方面,团队构建了"体外-体内"协同评价体系。体外通过细胞共培养模型模拟骨-软组织界面环境,发现复合材料的成骨诱导率(OIS)达72.4%,显著高于纯β-TCP(p<0.05)。体内植入实验显示,6个月后骨再生率(BRR)达83.6%±5.2%,且未观察到明显的炎症反应(IL-6水平<50pg/mL)。
技术经济分析表明,该复合材料具有产业化潜力:微波辅助合成法成本较传统工艺降低40%,生产效率提升3倍;银掺杂浓度可精准控制在0.1%-0.3%范围,兼顾抗菌效果与生物安全性。在食品保鲜领域,初步测试显示对李斯特菌的抑制率可达97.8%,但需进一步优化长期储存稳定性。
未来研究方向建议从三方面突破:1)开发梯度掺杂技术,实现抗菌活性与生物相容性的平衡调控;2)构建仿生释放系统,通过pH/酶触发机制控制银离子释放动力学;3)拓展至医疗植入物领域,重点解决长期植入引发的慢性炎症问题。该研究为纳米生物材料的多功能开发提供了重要技术路径,特别是在抗菌与组织工程交叉领域展现出广阔应用前景。
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