通过壳聚糖纳米颗粒共同递送黄芩素和左氧氟沙星，通过靶向铜绿假单胞菌（PAO1）的毒力因子及毒素相关基因，能够协同抑制其生长

《Journal of Pharmaceutical Innovation》：Co-delivery of Baicalin and Levofloxacin Via Chitosan Nanoparticles Synergistically Inhibits Pseudomonas aeruginosa PAO1 by Targeting Virulence Factors and Toxin-Associated Genes

双药物负载壳聚糖纳米颗粒协同抑制耐药铜绿假单胞菌生长及毒力机制研究，证实其具有缓释特性并显著降低DNA泄漏、 LasA 蛋白酶活性及毒素相关基因表达。

　　

摘要

目的

利用纳米制剂持续且同时释放抗生素和黄酮类化合物是一种针对耐药细菌的创新治疗方法。在本研究中，我们采用离子凝胶化技术将左氧氟沙星和植物黄酮类化合物黄芩素封装到壳聚糖纳米颗粒中，并探讨了这种双药载纳米颗粒对铜绿假单胞菌（P. aeruginosa PAO1）毒力因子和产毒基因的影响。

方法

我们使用多种表征技术研究了Bai-Lvx-CsNPs的物理化学性质。此外，还评估了Bai-Lvx-CsNPs对铜绿假单胞菌生长、毒力特征及相关毒素基因的影响。

结果

对Bai-Lvx-CsNPs的表征显示，这些颗粒呈球形，平均粒径为69.26±17.8纳米。从Bai-CsNPs和Lvx-CsNPs中释放黄芩素和左氧氟沙星的过程表现出缓慢且持续的释放曲线。Bai-Lvx-CsNPs的抑菌活性最强，其最小抑菌浓度（MIC）为1.56毫克/毫升（mg/mL），最低杀菌浓度（MBC）为12.5毫克/毫升（mg/mL）。此外，用双药载纳米颗粒处理后的细胞显示出最高的DNA泄漏量（24.08±0.43纳克/微升（ng/μL）。Bai-Lvx-CsNPs有效抑制了LasA蛋白酶活性和绿脓素生成，其活性分别降低了48.92±5.72%和13.33±4.57%。双重封装的纳米颗粒处理显著降低了细菌的群集运动能力和生物膜的代谢活性，分别降至1.7±1.6%和19.09±0.33%。进一步通过qPCR分析发现，Bai-Lvx-CsNPs处理后铜绿假单胞菌PAO1中的toxA和exoS基因表达水平显著降低，分别降低了0.37±0.05倍和0.45±0.07倍。

结论

综上所述，这些发现表明Bai-Lvx-CsNPs对铜绿假单胞菌PAO1具有显著的抗毒力作用。Bai-Lvx-CsNPs不仅能够抑制细菌生长，还能有效抑制多种毒力特征，显示出作为治疗铜绿假单胞菌感染新策略的潜力。未来需要进行体内研究以验证其有效性，并探索其作为替代或辅助治疗方法的适用性。