龙胆宁通过抑制METTL3介导的AKT2 m6A甲基化，进而影响HIF1α/SLC7A11调控的铁死亡（ferroptosis）过程，从而抑制结直肠癌的生长

《Naunyn-Schmiedeberg's Archives of Pharmacology》：Gentianine inhibits colorectal cancer growth via HIF1α/SLC7A11-modulated ferroptosis through suppression of METTL3-mediated AKT2 m6A methylation

铁死亡新机制；天然产物抑制结肠癌；METTL3/AKT2/HIF1α/SLC7A11轴；m6A修饰调控；GTN治疗潜力

　　

摘要

结直肠癌（CRC）是一种隐蔽性很强的疾病，治疗过程中的瓶颈往往源于药物耐药性和肿瘤异质性。近年来在肿瘤学领域新发现的一种细胞死亡机制——铁死亡（ferroptosis），可能为癌症治疗提供新的方向。龙胆碱（Gentianine，简称GTN）是一种天然提取物，具有多种药理活性。本研究通过探讨GTN对铁死亡的调控作用，探讨了其治疗CRC的潜力。将HCT116或SW480细胞用GTN处理24小时后，观察到以下变化：EdU阳性细胞比例下降、细胞迁移能力减弱、细胞死亡增加、丙二醛（MDA）和活性氧（ROS）的产生增多、超氧化物歧化酶（SOD）活性降低、Fe²⁺含量升高，同时GPX4和SLC7A11的表达下调；此外，AKT2和HIF1α的表达也下调，总m6A甲基化水平以及AKT2 N6-甲基腺苷的水平降低，METTL3的表达也减少。进一步实验表明，METTL3过表达、AKT2过表达、DMOG（一种HIF1α激活剂）或Fer-1（一种铁死亡抑制剂）能够消除GTN对细胞增殖和迁移的抑制作用，以及GTN对铁死亡的促进作用。在裸鼠体内建立了HCT116异种移植模型，并给予GTN处理。结果发现，GTN显著抑制了肿瘤体积的增长、肿瘤重量以及肿瘤组织中的Ki67表达；同时，肿瘤组织中的MDA水平升高、SOD活性降低、GPX4和SLC7A11的表达下调，总m6A甲基化水平及AKT2 N6-甲基腺苷的水平降低，METTL3的表达也减少。综上所述，我们的研究结果表明，GTN通过抑制新的METTL3/AKT2/HIF1α/SLC7A11轴介导的铁死亡机制来抑制CRC的进展，显示出其作为CRC治疗药物的巨大潜力。