TLR2介导的耐受性树突状细胞诱导：乳酸乳球菌递送HSP65预防1型糖尿病的新机制

《Cellular and Molecular Life Sciences》：Lactococcus lactis-HSP65 requires TLR2 to induce tolerogenic dendritic cells and confer protection against type 1 diabetes in a murine model

本研究针对1型糖尿病(T1D)缺乏有效预防策略的难题，探讨了重组益生菌L. lactis-HSP65通过TLR2通路诱导耐受性树突状细胞(tolDCs)进而调控免疫平衡的作用机制。研究发现该益生菌能显著提升肠道cDC1细胞TLR2表达，促进调节性T细胞(Tregs)分化，降低糖尿病模型小鼠发病率并改善胰岛功能。该成果为自身免疫疾病提供了新型免疫干预策略，发表于《Cellular and Molecular Life Sciences》。

　　

在免疫系统错误攻击胰岛β细胞的1型糖尿病(T1D)发病过程中，如何重建免疫耐受机制已成为治疗突破的关键难点。传统干预手段往往难以精准调控肠道-胰腺轴特有的免疫微环境，而近年来利用益生菌进行黏膜免疫调节的策略展现出独特潜力。其中，来源于麻风分枝杆菌的热休克蛋白65(HSP65)因其卓越的免疫调节功能备受关注，但当其通过基因工程技术改造的乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)进行定向递送时，如何激活特定免疫通路仍待阐明。

这项由圣保罗大学Ribeir?o Preto医学院Daniela Carlos团队开展的研究，首次揭示了L. lactis-HSP65通过TLR2受体激活cDC1细胞诱导免疫耐受的完整通路。研究人员发现，在T1D患者来源的树突状细胞中，TLR2等耐受相关基因表达显著受损，而重组HSP65能逆转这一缺陷并促进调节性T细胞(Tregs)分化。动物实验进一步证实，口服该益生菌可通过肠道cDC1-TLR2轴增强胰腺Treg应答，最终实现对糖尿病发展的有效遏制。该成果为自身免疫疾病的黏膜免疫治疗提供了新靶点，发表于《Cellular and Molecular Life Sciences》。

研究团队采用多维度技术平台验证其科学假设：通过公共转录组数据(GSE143143)分析T1D患者树突状细胞基因表达谱；利用流式细胞术检测小鼠肠道cDC1/cDC2亚群及TLR2⁺细胞比例；通过体外共培养体系评估CD103⁺树突状细胞对Treg分化的诱导能力；采用链脲佐菌素(STZ)诱导和NOD自发型两种T1D模型验证益生菌干预效果；借助葡萄糖耐受试验(GTT)和胰岛组织病理分析评估代谢功能改善情况。

T1D患者耐受性树突状细胞基因表达异常

对公共数据库RNA测序数据的分析显示，与健康人相比，T1D患者单核细胞来源的树突状细胞(moDCs)中TLR2、CD141、SIRPα等关键耐受相关基因表达显著下调，提示其免疫调节功能存在先天缺陷。

rHSP65诱导耐受性树突状细胞分化

体外实验证实，重组HSP65能显著提升骨髓来源树突状细胞(BMDCs)的MHC-II、CD80和CD103表达，并促进cDC1(CD11b^-CD103⁺)和cDC2(CD11b⁺CD103⁺)亚群分化。特别值得注意的是，rHSP65刺激后的树突状细胞分泌IL-10水平显著升高，且其与促炎因子的比值优于LPS刺激组，呈现明确的调节性表型。

益生菌干预改善糖尿病病理进程

在STZ诱导的T1D模型中，L. lactis-HSP65干预使糖尿病发病率从100%降至45.4%，空腹血糖显著改善。组织病理分析显示治疗组胰岛结构完整，胰岛素阳性面积增加，浸润炎症细胞减少。在自发发病的NOD模型中，益生菌同样将糖尿病发生率从80%控制在50%，证实其干预效果具有普适性。

肠道淋巴组织触发免疫调节 cascade

机制探讨发现，L. lactis-HSP65能特异性提升盲肠相关肠系膜淋巴结(cMLN)中TLR2⁺ cDC1细胞比例，并伴随PD-1⁺ Tregs数量增加。结肠组织基因检测显示，Ido1、Aldh1a2等耐受相关基因表达上调，TGF-β分泌增强，形成有利于免疫耐受的微环境。

TLR2缺陷消除益生菌保护效应

在TLR2基因敲除小鼠中，L. lactis-HSP65的干预效果完全消失：糖尿病发病率未获改善，cDC1细胞数量锐减，Tregs分化能力受损。体外实验进一步证实，TLR2或IL-10缺陷的树突状细胞无法有效诱导Treg分化，明确TLR2-IL-10轴在该免疫调节通路中的核心地位。

该研究系统阐释了黏膜递送HSP65通过TLR2通路诱导免疫耐受的新机制，不仅为理解肠道免疫与胰腺自身免疫的交互作用提供了新视角，更开创了利用工程化益生菌精准调控特定免疫通路的新策略。特别值得注意的是，研究揭示的cDC1-TLR2-Treg轴可能成为多种自身免疫疾病的共性治疗靶点，而基于益生菌的干预方式因其非侵入性和持续作用特点，在临床转化方面具有显著优势。未来研究可进一步探索该策略在人类T1D患者中的适用性，以及与其他免疫调节手段的协同效应，为自身免疫疾病的防治开辟新的路径。