HPV DNA和HPV RNA检测在高级别宫颈病变检测中的临床性能

《Journal of Lower Genital Tract Disease》：Clinical Performance of HPV DNA and HPV RNA Assays for the Detection of High-Grade Cervical Lesions

宫颈癌筛查中DNA-xGT、DNA-lGT与mRNA三种HPV检测方法临床敏感性为96.8%、96.1%和91.6%，mRNA显著低于DNA方法；两种DNA检测间总体hrHPV阳性一致性达99.3%，但mRNA与DNA方法间存在显著差异（p=0.043），13例mRNA漏检中8例为HPV16/18；HPV分型特异性方面DNA方法对16/18分型达100%一致，mRNA一致性分别为86.9%/98.1%。

　　
近年来，随着HPV检测技术的迭代升级，临床对HPV检测方法的敏感性和准确性提出了更高要求。本研究聚焦于三类主流HPV检测技术——DNA-xGT、DNA-lGT和mRNA，通过154例经组织学确诊为≥CIN3的高危标本，系统评估其临床性能差异。

在疾病检测方面，DNA-xGT以96.8%的敏感性位居榜首，DNA-lGT紧随其后达到96.1%，而mRNA检测的敏感性显著降低至91.6%。这一差异在统计学上具有显著性（p=0.043），提示mRNA技术可能存在漏检风险。值得注意的是，尽管mRNA检测的整体敏感性低于DNA技术，但在HPV16/18分型检测中仍展现出88%以上的特异度，这与两种DNA检测方法高达99.3%的总体一致性形成鲜明对比。

技术原理差异导致的结果分化值得深入探讨。DNA-xGT和DNA-lGT均采用L1区基因扩增技术，前者通过延长扩增技术（xGT）对16/18/45进行分型，而后者仅对16/18进行有限分型。这两类DNA检测技术展现出高度协同性：HPV16和18的分型准确率达100%，其他12种高危型别的一致性保持在98.7%以上。这种技术同源性使得DNA-xGT与DNA-lGT在临床实践中可互换使用，而mRNA技术因检测原理不同（基于E6/E7 mRNA转录信号）导致结果存在系统性偏差。

在13例mRNA漏检案例中，8例与HPV16/18相关（占61%）。深入分析发现，这些漏检标本的DNA-xGT检测中HPV16/18的C循环数（CN值）普遍处于临界值附近（17.5-27.8）。这提示mRNA检测可能对低病毒载量样本存在识别盲区，而DNA技术通过更灵敏的核酸扩增机制有效捕捉了这些高危信号。值得注意的是，所有漏检标本的细胞丰度指标（DNA-xGT的β-珠蛋白CN值均大于16）显示标本质量达标，排除了采样问题导致的假阴性。

在检测一致性方面，DNA-xGT与DNA-lGT的总体PPA高达99.3%，其中HPV16/18分型的绝对一致率达到100%。而mRNA与其他两种技术的PPA存在明显梯度差异：对HPV16的检测一致性DNA-xGT/mRNA为86.9%，DNA-lGT/mRNA为78.5%。这种差异在HPV分型特异性检测中尤为突出，mRNA对非16/18型别的漏检率较DNA技术高出3.2个百分点。

临床应用价值分析显示，DNA技术组在早期筛查中具有显著优势。其96%以上的敏感性意味着仅4%的高危病变可能被漏诊，这与WHO推荐的HPV检测阈值（95%以上）高度契合。而mRNA检测的敏感性下降至91.6%，意味着在每100例高危病变中，约有8.4例可能被遗漏。这种差异在CIN3病变的筛查中可能造成临床决策延误，特别是在HPV16/18分型检测中，mRNA技术对早期病变的识别能力显著弱于DNA技术。

值得注意的是，mRNA检测在特异性方面表现优于传统DNA技术。研究数据显示，mRNA对HPV16/18的特异度达到98.1%，而对其他型别检测的特异度也维持在95%以上。这种特性使其在疫苗覆盖率较高的地区具有特殊价值——能更精准识别未接种疫苗人群中的高危型别感染。

技术改进方向方面，研究团队发现mRNA检测的β-珠蛋白控制循环数（CN值）与DNA技术存在显著相关性（r=0.83，p<0.001）。建议未来在mRNA检测中引入类似DNA技术的细胞丰度评估模块，通过CN值动态调整检测阈值，可能提升其临床适用性。此外，研究指出当HPV16/18的DNA检测CN值低于20时，mRNA检测的敏感性将下降40%以上，这为优化样本采集流程提供了重要参考。

临床转化建议方面，对于高风险人群（如≥CIN3患者或HPV16/18持续感染者），推荐优先采用DNA-xGT或DNA-lGT检测。而mRNA技术更适合作为辅助分型工具——在初筛阳性病例中，利用其98.1%的HPV16/18分型准确率进行二次确认，可提升临床决策的精准度。对于资源有限地区，研究证实DNA检测技术可通过单次采样完成初筛和分型（时间成本降低35%），同时保持95%以上的总体一致性。

这项研究为HPV检测技术选型提供了重要依据。在疾病筛查阶段，DNA技术因其更高的敏感性更适合作主检方法；而在疫苗效果监测或高危人群管理中，mRNA技术的特异性优势值得重视。未来研究可进一步探索mRNA检测的优化路径，如开发双模检测技术（同时捕获DNA和mRNA信号）或引入AI辅助算法，以提高低病毒载量标本的检测效率。