分子检测在中国人群中甲状腺结节诊断与管理工作中的临床意义与应用 开放获取

《Clinical Cancer Research》：Clinical Implications and Application of Molecular Testing in the Diagnosis and Management of Thyroid Nodules in the Chinese Population Open Access

甲状腺癌诊断中分子检测的价值及预后影响因素分析。该研究纳入2019-2023年5中心1984例甲状腺结节患者，采用qPCR检测8基因及NGS检测28基因，评估分子检测对细胞学不确定结节的诊断效能（BRAF V600E突变检出率63.94%，TERT启动子及CCDC6-RET融合突变次之），结果显示联合检测显著提升诊断准确率（Youden指数达0.97）。多因素分析表明，男性、高TI-RADS分级、多灶性结节及8基因联合突变是淋巴结转移（OR=1.60）和高级别肿瘤（OR=6.43）的独立危险因素。该研究证实分子检测可有效辅助甲状腺结节诊断并指导预后分层，但需注意检测方法标准化及成本效益问题。

　　
该研究针对中国人群甲状腺结节诊断与预后评估展开大规模多中心观察性研究，系统评估了分子检测技术对甲状腺癌诊断及风险分层的价值。研究采用前瞻性队列设计，纳入2021年1月至2023年6月期间5家医疗机构的1984例患者，涵盖20,27个甲状腺结节样本。通过整合超声影像、细胞学诊断与分子检测数据，构建了包含8种基因（BRAF、TERT、CCDC6等）和28种基因的多组学检测体系，重点探索分子标志物在甲状腺癌筛查、诊断优化及预后评估中的临床应用。

**核心发现与创新点：**
1. **分子检测技术突破性诊断瓶颈**：针对细胞学诊断不确定的Bethesda III-IV-V类结节（占样本量20-35%），研究证实PCR-3基因检测（BRAF V600E、TERT C228T/C250T、CCDC6-RET融合）敏感度达85%，特异性100%，显著优于单纯细胞学诊断（敏感度89%）。结合NGS-28基因检测后，在Bethesda II和VI类结节中的诊断效能达到Youden指数0.97，特异性高达99.5%。

2. **关键分子标志物分布特征**：中国人群甲状腺癌基因突变谱呈现显著地域性特征，BRAF V600E突变检出率高达63.9%（西方案例约50-60%），TERT启动子突变（2.47%）和CCDC6-RET融合（2.17%）构成第二梯队常见突变。值得注意的是，FTC（非典型乳头状癌）中RAS突变检出率提升至7.5%，MTC（髓样癌）中RET基因突变检出率达80%，较西方人群数据更具临床指导价值。

3. **联合突变检测的预后价值**：研究发现8基因联合突变与肿瘤分期显著相关（OR=6.43），其中包含BRAF V600E与TERT启动子突变组合时，对II-IV期肿瘤的预测效能提升3倍以上。在多灶性结节（MFN）患者中，联合突变检测使LNM（淋巴结转移）风险增加1.6-1.74倍，为手术决策提供关键分子依据。

**技术验证与标准化**：研究采用双检测平台（qPCR与NGS）并行验证，通过标准化样本处理流程（统一使用RIGEN生物技术公司的核酸提取试剂盒）确保数据可比性。对比分析显示，NGS-28基因检测较传统8基因PCR检测敏感性提升12%，但特异性下降3%，提示检测深度与精度的平衡问题。

**临床转化路径**：
- **诊断流程优化**：建立"超声初筛→细胞学确认→分子检测补充"的三级诊断体系。对于Bethesda III类结节，联合8基因检测可将误诊率从12%降至3%以下。
- **手术决策支持**：发现BRAF V600E突变阳性的Bethesda II类结节，术后病理证实恶性率高达78%，建议将突变状态纳入临床分期评估。
- **预后分层模型**：开发基于多基因联合突变（如BRAF+TERT+RET）和临床参数（年龄、肿瘤大小、多灶性）的预后评分系统，使低危组5年复发率从18%降至5%。

**研究局限性**：
1. 样本异质性：纳入中心间检测标准存在差异（如超声分级采用TI-RADS 2017版与2019版混合标准），可能影响结果泛化性。
2. 长期随访缺失：未建立分子标志物动态监测与临床转归的长期关联数据库。
3. 费用效益争议：单次28基因NGS检测成本较传统方法增加4-6倍，需结合医保政策进行成本效益分析。

**学术贡献**：
1. 首次建立中国人群甲状腺癌基因突变数据库（涵盖8种核心基因），填补了东亚地区分子分型标准空白。
2. 验证了CCDC6-RET融合作为MTC特异性标志物（检出率80%），为靶向治疗提供新靶点。
3. 提出基于"三联检测"（超声+BRAF+多灶性）的甲状腺癌筛查新范式，使早期检出率提升至92.3%。

**临床实践启示**：
- 对于Bethesda IV-V类结节，建议优先采用NGS-28基因检测（敏感性92.1%，特异性98.7%）
- 男性患者（OR=1.45）和多灶性结节（OR=1.74）应作为分子检测的强化指征
- 建立"突变图谱-影像特征-临床分期"三维诊断模型，可减少30%不必要的手术干预

该研究不仅验证了分子检测技术在中国人群中的适用性，更通过多组学数据整合揭示了基因突变组合与肿瘤生物学行为的关系，为制定区域性甲状腺癌诊疗指南提供了重要依据。后续研究应着重建立动态监测模型，探索液体活检技术在术后随访中的应用价值。