泰国爬行动物中隐孢子虫和十二指肠贾第虫的检测

隐孢子虫和贾第鞭毛虫在泰国春武里省爬行动物养殖场的感染情况研究。采集501份粪便样本，检测到隐孢子虫13份（2.5%），主要为C. avium（84%）和C. serpentis（1例）；贾第鞭毛虫25份（5%），均为B型组装体。肉食性爬行动物感染率显著高于草食性动物（p=0.015），提示食物传播可能为感染途径。该研究为评估爬行动物作为隐孢子虫和贾第鞭毛虫中间宿主提供了依据。

　　
本研究针对泰国春武里府一家爬行动物养殖场中的蜥蜴、龟及蛇类展开肠道原虫调查，重点分析隐孢子虫（Cryptosporidium）和贾第鞭毛虫（Giardia duodenalis）的感染情况及其潜在公共卫生意义。研究通过DNA提取、 nested PCR检测及序列分析，揭示了这些爬行动物中病原体的分布特征。

**样本概况与检测方法**
研究共采集501份爬行动物粪便样本，涵盖3种蜥蜴（鬣蜥、鬃狮蜥、变色龙）、2种龟类（高加索陆龟、红脚龟）及蛇类。DNA提取采用Invitex Molecular的PSP粪便DNA试剂盒，通过多基因嵌套PCR检测目标病原体。检测涉及的基因包括Cryptosporidium的18S rRNA和贾第虫的TPI、BG、GDH等保守基因。

**Cryptosporidium检测结果**
1. **感染率**：总体检出率为2.5%（13/501），其中鬣蜥感染率最高（7/363，1.9%），鬃狮蜥次之（6/79，7.6%）。蛇类和龟类未检出。
2. **物种分布**：11例（84.6%）鉴定为Cryptosporidium avium（曾用名C. avian genotype V），1例为Cryptosporidium serpentis。值得注意的是，C. avium在蜥蜴中的高感染率与其跨物种传播特征相符，该物种既往主要分离于鸟类宿主（如虎皮鹦鹉、文鸟等），但本研究的发现扩展了其宿主范围至爬行动物。
3. **流行病学关联**：经Fisher精确检验发现，C. avium感染率与食性存在显著关联（p=0.015），肉食性爬行动物（如鬃狮蜥）感染率显著高于草食性动物（如陆龟）。推测肉食性蜥蜴可能通过捕食小型哺乳动物或接触污染水源而暴露于病原体。

**Giardia duodenalis检测结果**
1. **感染率**：总体检出率为5%（25/501），其中鬣蜥感染率最高（15/363，4.1%），其次是鬃狮蜥（6/79，7.6%）。
2. **基因型分布**：所有阳性样本均鉴定为Giardia assemblage B，该组装体已知具有人畜共患潜力。值得注意的是，在红脚龟（Chelonoidis carbonarius）和非洲沙酒龟（Stigmochelys pardalis）中也检测到B型贾第虫，提示该组装体可能具有较广泛的宿主适应性。
3. **交叉污染可能性**：食草性蜥蜴（如陆龟）与食肉性蜥蜴（如鬃狮蜥）的感染率差异（0.8% vs 7.6%）表明，病原体可能通过饲料或水源交叉传播。研究同时发现球蟒（Python regius）中存在25%的阳性率（2/8），提示蛇类可能成为重要传播环节。

**病原体特征与公共卫生意义**
1. **Cryptosporidium avium的流行病学特征**：该物种在养殖场中呈现聚集性分布，11例感染均来自同一养殖场，且与肉食性蜥蜴的食性关联显著。其高检出率可能源于养殖场中鸟类与爬行动物的环境交叉污染，或饲料中存在鸟类粪便污染。
2. **Cryptosporidium serpentis的独特发现**：在1只鬣蜥样本中检测到C. serpentis，这是该物种首次在蜥蜴宿主中被记录。既往该物种主要分离于蛇类（如蟒蛇、眼镜蛇），但本研究的发现提示其可能通过卵生方式或环境接触传播至蜥蜴。
3. **Giardia assemblage B的潜在风险**：B型贾第虫在哺乳动物中已被证实具有人畜共患性。本研究中该组装体在爬行动物中的高检出率（5%感染率）可能提示其在环境中的持续存在。需注意的是，当前检测方法仅能鉴定物种/组装体，无法区分感染态与携带态，后续需结合形态学观察（如粪便涂片）和临床症状评估。

**研究局限性及未来方向**
1. **检测方法的局限性**：分子检测可能无法区分当前感染与既往感染，需结合oocyst检出率评估实际感染情况。
2. **宿主适应性研究不足**：尽管检测到C. avium和C. serpentis，但未明确其是否具有适应蜥蜴的基因型特征，需进一步进行全基因组测序。
3. **传播途径验证缺失**：当前数据无法确认病原体是否通过直接接触或食物链传播，建议后续开展纵向观察，记录不同季节的感染率变化及环境样本（如饲料、水源）的污染情况。
4. **宿主特异性分析待深化**：尽管B型贾第虫在爬行动物中广泛存在，但其与哺乳动物同型贾第虫的致病性差异尚不明确，需通过动物实验验证交叉感染风险。

**结论**
本研究首次在鬃狮蜥中检测到高比例的Cryptosporidium avium感染，并发现C. serpentis在鬣蜥中的新宿主记录。Giardia assemblage B在爬行动物中的高流行率提示环境中的持续传播风险。这些发现为评估爬行动物养殖场的公共卫生风险提供了重要依据，建议加强饲料与水源的卫生管理，并针对高感染率的物种（如鬃狮蜥）制定预防措施。