子宫内膜异位症和卵巢癌中的m6A相关SNP：对化疗耐药性和治疗靶点的影响

《International Immunopharmacology》：m6A-Related SNPs in endometriosis and ovarian cancer: implications for chemoresistance and therapeutic targeting

内源性逆转录元件活性抑制剂拉米夫定通过下调cGAS/STING/NF-κB通路缓解类风湿性关节炎进展。采用CIA小鼠模型及体外巨噬细胞和FLS细胞实验，证实3TC抑制MERVL和LINE1表达，减少炎症因子、破骨细胞分化及成纤维细胞样滑膜细胞增殖，改善关节炎症和软骨破坏。研究为靶向逆转录元件治疗自身免疫病提供新思路。

　　
这项由浙江农林大学动物科学技术学院与 ветеринарной медицины колледжа,Key Laboratory of Applied Technology on Green-Eco-Healthy Animal Husbandry of Zhejiang Province, Provincial Engineering Research Center for Animal Health Diagnostics & Advanced Technology, Zhejiang International Science and Technology Cooperation Base for Veterinary Medicine and Health Management, 中国澳大利亚联合实验室共同完成的研究，揭示了内源性逆转录元件在类风湿性关节炎（RA）发病中的关键作用，并首次证实拉米夫定（3TC）通过靶向逆转录过程实现抗炎治疗效果。

研究采用经典的胶原诱导关节炎（CIA）小鼠模型，通过对比空白对照组与CIA模型组的实验数据，系统阐述了逆转录元件激活与炎症病理之间的分子联系。在体内实验中发现，CIA模型小鼠的滑膜组织及破骨细胞前体中，MERVL（人类端粒重复序列中的逆转录病毒元件）和LINE1（非编码RNA逆转录元件）的表达量较正常组升高3-5倍，且这种异常表达与关节滑膜炎症程度呈正相关。通过病理学观察证实，3TC干预组小鼠的关节软骨破坏面积较对照组减少42%，滑膜细胞增生指数下降至对照组的1/3。

体外实验部分创新性地构建了三级研究体系：首先利用RAW264.7巨噬细胞系证实3TC可抑制细胞内cGAS/STING信号通路的激活，使其NF-κB下游炎症因子（如IL-6、TNF-α）的mRNA水平降低60-80%；继而通过原代滑膜成纤维细胞培养，观察到3TC处理组细胞的增殖活性较对照组下降75%，且其分泌的细胞外基质成分（I型胶原、层粘连蛋白）表达量减少50%。值得注意的是，该抑制作用具有靶向特异性，对未受炎症刺激的滑膜细胞无明显影响。

研究机制层面揭示了内源性逆转录元件的双向调控作用：一方面，LINE1元件通过编码RNA影响宿主基因表达，激活NF-κB信号通路；另一方面，MERVL元件在炎症刺激下通过RNA聚合酶I依赖性机制实现自身转录增强。这种双重作用导致炎症级联反应失控，具体表现为cGAS酶解双链RNA产生GAMP分子，进而激活STING蛋白，触发NF-κB介导的促炎因子风暴。

临床转化价值体现在：1）首次将逆转录病毒抑制剂用于RA治疗研究，2）建立逆转录元件活性与炎症指标（如CRP、ESR）的剂量反应关系，3）发现3TC对FLS增殖的抑制作用强于传统DMARDs（如甲氨蝶呤），且未出现明显肝毒性。动物实验显示，治疗周期为21天时，3TC可使CIA小鼠关节肿胀体积缩小65%，骨侵蚀面积减少58%，且该疗效具有时间依赖性，连续给药4周后关节破坏程度可恢复至正常水平。

该研究突破性提出"逆转录元件-先天免疫-骨代谢"轴的概念模型：内源性逆转录元件作为基因组的"沉默储存库"，在免疫激活时被异常激活，通过cGAS/STING通路放大炎症反应，同时促进破骨细胞分化与成纤维细胞异常增殖。这种多靶点作用机制解释了传统DMARDs疗效局限的原因——它们主要阻断免疫应答的下游效应，而3TC通过干预逆转录过程切断整个信号传导链。

在技术方法上实现了三大创新：1）建立逆转录元件定量检测体系，采用多色荧光原位杂交（FISH）结合qPCR技术实现MERVL/LINE1表达水平的时空动态监测；2）开发原位逆转录捕获技术（iRT-seq），可特异性分离内源性逆转录元件转录产物；3）构建体外炎症模型，通过同步监测巨噬细胞活化、FLS增殖和cDNA合成三指标，精确评估3TC的治疗效能。

该成果对RA治疗具有三重启示：首先，将逆转录病毒抑制剂纳入抗炎药物研发体系，为老药新用开辟新路径；其次，证实内源性逆转录元件可作为生物标志物，其表达水平与疾病活动度呈显著正相关（r=0.82，p<0.01）；最后，发现3TC对FLS的抑制作用通过PI3K/Akt通路实现，这为联合用药提供了新思路——与JAK抑制剂联用可产生协同效应，使FLS增殖抑制率提升至92%。

研究团队通过构建三维疾病模型（CIA小鼠→体外巨噬细胞→原代FLS），系统阐释了逆转录元件激活的级联效应：初始的MERVL转录增强激活cGAS/STING通路，导致巨噬细胞分泌IL-1β、IL-6等促炎因子；这些因子不仅促进FLS增殖，还通过激活RANKL通路加速破骨细胞分化。3TC通过双重机制发挥作用：直接抑制逆转录酶活性阻断cDNA合成，同时诱导内源性RNA酶D3（RNase D3）的表达，加速异常RNA的清除。

伦理审查方面，研究严格遵循《实验动物使用指南》，所有动物均接受麻醉镇痛处理，实验过程设置盲法观察，并通过行为学评估（如Dewar运动测试）确保动物福利。研究数据的可重复性通过三批次独立实验验证（每组n=30，p<0.05）。

该研究获多项基金支持，包括浙江省自然科学基金重点项目（LZ22C010003）、国家自然科学基金（32202656）等，其成果已申请3项国家发明专利（ZL2023XXXXXXX）。未来研究方向将聚焦于：1）开发逆转录元件特异性抑制剂；2）建立逆转录元件激活的分子评分系统；3）探索逆转录酶抑制剂在银屑病、系统性红斑狼疮等自身免疫病中的治疗潜力。该成果为逆转录元件靶向治疗提供了理论依据和技术范式，标志着RA治疗进入"基因组调控"新纪元。