综述：环状RNA在神经精神疾病中的新兴作用

《Translational Psychiatry》：The emerging role of circular RNAs in neuropsychiatric disorders

本综述系统阐述了环状RNA（circRNA）在神经精神疾病中的新兴作用，重点探讨了其作为稳定生物标志物和治疗靶点的巨大潜力。文章深入解析了circRNA通过分子海绵作用（如吸附miRNA）、调控突触可塑性、影响神经分化等机制参与阿尔茨海默病（AD）、帕金森病（PD）、抑郁症、精神分裂症（SCZ）、双相情感障碍（BD）和自闭症谱系障碍（ASD）等疾病发生发展的最新进展，为神经精神疾病的精准诊疗提供了新视角。

　　

引言

21世纪分子生物学的范式转变通过大规模项目如FANTOM3得以体现，证明尽管缺乏可识别的开放阅读框（ORF），小鼠组织中仍有广泛的非编码RNA（ncRNA）表达。这些发现强调了ncRNA的功能重要性。全面的转录组学研究揭示，近90%的人类基因组会发生转录，其中仅有1-2%的转录本编码蛋白质，而大多数被归类为ncRNA。相当大比例的ncRNA在哺乳动物大脑中高度表达，呈现出精确的时空模式，表明它们具有重要的功能作用，而不仅仅是转录副产物。

作为ncRNA家族中的一个独特类别，环状RNA（circRNA）因其通过非典型的“反向剪接”事件形成的独特环状结构而区分开来，其中5'和3'剪接位点共价连接形成一个闭合环状RNA。circRNA在其生物发生和结构组织方面表现出相当大的多样性。这种多样性产生了多种亚型，包括单外显子circRNA、多外显子circRNA、外显子-内含子circRNA（EiciRNA）和内含子circRNA（ciRNA），每种都可能发挥不同的功能作用。这些环状分子最早于20世纪70年代在类病毒中发现，但在随后的许多年里，它们主要被认为是真核系统中异常剪接事件产生的冗余产物。然而，在过去十年中，先进的测序平台和创新计算工具的发展将circRNA推向了RNA研究的前沿。通常，circRNA含有特定微小RNA（miRNA）的结合位点，并作为miRNA海绵发挥作用，从而降低这些短链非编码RNA的生物利用度。此外，中枢神经系统表现出特别高的circRNA表达水平，它们可以调节神经元发育、突触可塑性和神经发生，这些过程在神经精神疾病中常常失调。

神经精神疾病，包括抑郁症、精神分裂症（SCZ）、自闭症谱系障碍（ASD）以及阿尔茨海默病和帕金森病等神经退行性疾病，影响着全球数百万人，给诊断和治疗带来了巨大挑战。这些疾病的特征是大脑区域和神经回路的功能障碍，这些区域和回路是情绪调节、认知和行为的基础。神经精神疾病的复杂性源于遗传、环境和神经生物学因素的相互作用，许多疾病显示出明显的遗传成分。尽管进行了广泛的研究，但这些疾病的确切分子机制仍 largely 不清楚。最近的研究强调了非编码RNA，特别是circRNA，在调节疾病相关通路中的潜在重要性。

当前研究揭示了circRNA在调节关键神经生物学过程中的潜在作用，如突触功能、神经元可塑性和应激反应，这些过程在神经精神疾病中失调。在多种疾病中观察到circRNA表达的改变，例如抑郁症、阿尔茨海默病（AD）和帕金森病（PD），表明它们可能参与疾病发病机制。此外，它们的稳定性和组织特异性表达谱使circRNA成为诊断和监测这些疾病进展的有吸引力的生物标志物候选物。

circRNA：对大脑发育和可塑性的贡献

circRNA与大脑发育

CircRNA被确定为哺乳动物大脑中动态表达的分子，深刻地改变了我们对神经发育过程中基因调控的理解。2015年，首次有研究报告称circRNA在哺乳动物中表现出不同的时空表达模式，无偏分析揭示了其高度复杂的调控景观。后续研究进一步揭示了它们在大脑发育中的关键作用，特别是在神经元分化、轴突生长和突触形成中。

CircRNA在人类妊娠的早期和晚期阶段高度上调，参与关键的神经发育通路，包括轴突发生、神经元导向和突触组织。例如，在人类胚胎妊娠22周时的前额叶皮层中高表达的circSLC45A4调节神经元分化，其干扰导致SH-SY5Y神经母细胞瘤细胞的自发分化。跨物种的比较分析进一步表明，与其他器官系统相比，脑组织表现出显著更高的circRNA丰度和多样性。在啮齿类动物中，大脑中circRNA的表达随着年龄的增长而逐步增加，在幼年大鼠中观察到最低水平，并在整个发育过程中稳步上升。特定的circRNA，例如那些从Pvt1、Ano3、Sec14l5和Rnf169基因转录的circRNA，显示出从胚胎阶段到成年期的持续上调，而其相应的线性mRNA转录本在出生后达到峰值。类似地，猪大脑皮层的转录组分析进一步证明circRNA表达受发育调控。上调的转录本集中于应激适应、生殖和免疫调节以及代谢控制，而下调的转录本主要涉及神经元功能、应激通路和信号转导，突出了在皮质成熟过程中circRNA网络的动态重编程。

总之，这些发现表明circRNA表现出进化上保守但又具有物种特异性的表达模式，以阶段依赖的方式调节关键的神经发育过程。它们的动态表达暗示了在协调大脑发育过程中的神经元成熟、连接性和可塑性方面发挥着基本作用。

circRNA在神经元分化和突触可塑性中的作用

除了在早期神经发育中的作用外，circRNA是神经分化和突触可塑性的关键调节因子，这两者对于认知功能都至关重要。它们的表达在不同的脑区有所不同，包括前额叶皮层、嗅皮质、纹状体、小脑和海马体，其中许多表现出区域特异性富集。值得注意的是，对6231个大脑表达的circRNA的分析发现，有4030个在皮层和海马体中共享，而其他则显示出区域特异性的表达模式，暗示了专门的功能作用。

许多circRNA来源于调节神经元分化和突触传递的基因。此外，亚细胞定位研究表明，相当大比例的circRNA集中在突触小体中，它们可能直接影响突触功能。在分子水平上，circRNA通过调节突触蛋白表达、长时程增强（LTP）和长时程抑制（LTD）来调节突触活动。它们还参与关键信号通路，包括NMDA受体介导的信号传导、MAPK信号传导和GABA受体功能，这些通路控制着突触可塑性和神经传递。重要的是，突触活动本身调节circRNA表达，这表明circRNA和突触修饰之间存在相互关系。

总之，这些发现突出了circRNA作为神经元分化和突触重塑不可或缺的组成部分。它们微调突触效能和可塑性的能力表明，它们在学习和记忆等高阶认知过程中扮演着关键角色。

circRNA调节的大脑发育和神经可塑性

CircRNA通过多种分子机制影响大脑发育，包括与微小RNA（miRNA）、RNA结合蛋白（RBP）和转录因子的相互作用，形成复杂的调控网络，支配神经元分化和可塑性。它们作为miRNA海绵，隔离特定的miRNA以调节基因表达，这是circRNA塑造神经发育的一个有据可查的机制。例如，circZNF827与参与神经元分化的miRNA相互作用，从而调节神经发生所必需的基因表达。

CircRNA还通过影响突触蛋白的表达和定位来调节突触功能。研究表明，某些circRNA调节PSD-95、突触素和AMPA受体亚基，从而影响突触强度和可塑性。此外，circRNA参与表观遗传调控，影响染色质重塑和支配神经元分化和成熟的转录程序。

基于现有证据，我们得出结论，大脑中的circRNA不仅有助于神经元分化和成熟，而且对突触可塑性和神经回路发育产生更广泛的调控影响。它们的时空表达模式以及与不同分子伙伴相互作用的能力突出了它们在塑造大脑结构和功能组织中的基本作用。进一步的研究对于揭示circRNA影响神经发育的精确机制及其在神经精神疾病中的潜在作用至关重要。

circRNA：在神经精神疾病中的意义

神经系统疾病中的circRNA

阿尔茨海默病

阿尔茨海默病（AD）是一种进行性神经退行性疾病，其病理特征为神经毒性淀粉样β蛋白（Aβ）的积累、tau蛋白过度磷酸化、神经炎症和大脑内广泛的神经元萎缩。新兴的环状转录组学证据显示，通过分析脑脊液、外周血和脑区样本，AD患者与健康对照相比，circRNA表达谱发生显著改变。

最近的研究在AD患者的前额叶皮层中鉴定出408个差异表达的circRNA，特别关注了两个与tau蛋白过度磷酸化相关的GSK3β环状转录本。此外，Dube等人鉴定出3,547个差异表达的circRNA，其中28个转录本的表达水平与痴呆严重程度、神经病理进展和AD诊断密切相关。这些发现在AD动物模型研究中得到证实，在散发性AD模型SAMP8小鼠中鉴定出253个异常表达的circRNA。生物信息学分析表明，这些circRNA主要通过Aβ清除、髓鞘功能调节和突触维持来调节AD进程。

circRNA在AD中的功能意义是广泛的，涵盖RNA剪接、自噬体组装、胞质分裂、凋亡过程以及各种信号通路，包括腺苷酸激活蛋白激酶（AMPK）和p53，这些都与AD病理密切相关。如图所示，大多数AD相关的circRNA作为miRNA海绵发挥作用，影响细胞凋亡、炎症反应和氧化应激，从而导致认知障碍和记忆丧失。值得注意的是，某些circRNA可能协同促进神经毒性Aβ形成，创造一个加剧AD进展的恶性循环。来自人类tau基因的circRNA通过滚环翻译产生环状tau蛋白的发现，进一步强调了circRNA在AD病理中的复杂作用。总的来说，这些发现强调了差异circRNA表达对AD病理变化和进展的贡献。

众所周知，circRNA在外泌体和血浆中表现出高度稳定性，这赋予它们作为疾病诊断生物标志物的巨大潜力。最近的一项研究显示circRNA的表达与痴呆的临床和神经病理严重程度存在显著相关性。值得注意的是，circRNA表达的变化发生在AD明显症状出现之前，并且与常染色体显性遗传AD显著相关。这些结果意味着circRNA不仅可用作AD的诊断标志物，还可作为AD风险的预测因子。

此外，在AD的背景下，circRNA被认为是很有前景的治疗靶点。三七皂苷是草药的主要活性成分，已在AD模型中证明能增强认知功能、减少Aβ沉积和减轻氧化应激。用三七总皂苷治疗的AD模型小鼠，其海马体中一些circRNA的表达发生显著改变。进一步探索表明，这些circRNA参与了AD相关的分子通路和生物过程，提示PNS可能通过调节AD相关circRNA的表达来缓解AD相关症状。类似地，小檗碱是另一种草药，已被证明能有效缓解AD症状并在神经保护中发挥关键作用。在用Aβ42处理的人类神经元（HN）细胞中，发现小檗碱能上调circHDAC9的表达，从而减轻Aβ42的神经毒性作用。这表明小檗碱通过circHDAC9通路在AD患者中发挥神经保护作用。这些发现表明，靶向circRNA的策略在AD治疗和缓解其相关症状方面具有重要的临床潜力。

总之，circRNA通过其独特的表达谱，从根本上参与了从正常认知功能到AD发病机制的进程。它们作为诊断生物标志物和治疗靶点的双重潜力，为制定早期干预策略和更有效的AD临床管理带来了重大希望。

帕金森病

帕金森病（PD）是一种进行性神经退行性疾病，其特征是黑质中多巴胺能神经元的选择性丧失。新一代测序技术的最新进展揭示了PD小鼠模型的皮层、海马体、纹状体和小脑中存在大量差异表达的circRNA。生物信息学分析表明，这些circRNA错综复杂地参与关键的神经元过程，包括cGMP-PKG信号通路、谷氨酸能突触传递、轴突导向和与神经发生相关的细胞形态发生，从而在PD发病机制中发挥关键作用。

PD病理的一个标志是α-突触核蛋白（a-Syn）的异常积累。在PD中涉及的circRNA中，CDR1as通过作为miR-7的分子海绵发挥作用，有效地隔离并负调控其表达，从而成为一个关键调节因子。而miR--7又通过靶向其3'-UTR来抑制α-Syn mRNA的翻译，从而降低a-Syn蛋白水平并保护神经元免受氧化损伤。此外，miR-7通过诱导自噬促进a-Syn聚集体的清除，并通过NF-κB通路发挥神经保护作用。值得注意的是，治疗药物普拉克索已被证明可通过降低miR-7表达来调节这一通路，导致a-Syn水平降低，进一步强调了这一调控轴的临床相关性。

另一个关键的circRNA，circDLGAP4，在PD模型中显著下调。功能研究表明，circDLGAP4调节miR-134-5p和CREB表达，从而维持细胞活力、减少凋亡、减轻线粒体损伤和增强自噬。此外，circDLGAP4招募EIF4A3来上调HMGA2，增加其mRNA稳定性，这通过减轻炎症和氧化应激有助于PD的神经保护。如表3总结，PD相关的circRNA主要作为miRNA海绵发挥作用，通过调节凋亡、炎症和a-Syn表达来影响多巴胺能神经元的存活。这些circRNA的表达水平与PD临床表现的严重程度密切相关，并且恢复其表达已被证明可以减轻神经变性，突出了它们作为神经保护剂和治疗靶点的潜力。

其他神经系统疾病

肌萎缩侧索硬化

肌萎缩侧索硬化（ALS）是一种致命的神经退行性疾病，其特征是脑干和脊髓中运动神经元的选择性变性。大量研究在ALS患者的组织和血清中鉴定出大量差异表达的circRNA。其中，circSETD3和circSUSD1与疾病发病呈负相关，而circTNRC6B和circFAM120A水平与功能障碍呈正相关。值得注意的是，circTNRC6B水平还与疾病持续时间和生存时间负相关，并且circSUSD1和circTNRC6B作为潜在的诊断生物标志物表现出高特异性和敏感性。此外，FUS基因的突变（ALS的已知风险因素）已被证明会破坏circRNA的生物发生，表明FUS调控的circRNA可能有助于ALS的发病机制。然而，将circRNA与ALS进展直接联系起来的证据仍然有限，需要进一步研究。

亨廷顿病

亨廷顿病（HD）是一种遗传性神经退行性疾病，由HTT基因外显子1中的CAG三核苷酸重复扩增引起。HTT CAG突变已被证明会损害circRNA生物发生，随着CAG重复长度的增加，circRNA表达单调递减。有趣的是，源自HTT基因外显子2-6的circHTT在HD患者的后大脑皮层中表达上调，并且其表达与CAG重复数正相关。circHTT水平升高通过减少细胞增殖、降低核内HTT定位以及改变核和细胞形态来促进HD发病机制。这些发现表明，线性mRNA和circRNA之间的失衡可能破坏神经适应性，驱动HD进展。

多系统萎缩

多系统萎缩（MSA）是一种散发性神经退行性疾病，目前对其circRNA的研究有限。仅有一项研究在MSA患者的额叶皮层中鉴定并验证了五个circRNA（源自IQCK、MAP4K3、EFCAB11、DTNA和MCTP1）。这些发现为进一步探索circRNA在MSA病理中的作用奠定了基础。

总之，circRNA在包括PD、ALS、HD和MSA在内的各种神经系统疾病的发病机制中扮演着多样且关键的角色。它们参与关键分子通路，加上其作为诊断生物标志物和治疗靶点的潜力，强调了需要继续研究其功能机制和临床应用。

精神疾病中的circRNA

抑郁症

抑郁症是一种普遍的情绪障碍，其特征是持续的悲伤、绝望和快感缺乏感。最近的进展突出了circRNA作为生物标志物的潜力，因为它们具有高稳定性、进化保守性以及细胞或组织特异性表达模式。研究已经在抑郁症患者的血液中鉴定出许多差异表达的circRNA，其中一些显示出诊断和预后潜力。

例如，重度抑郁症（MDD）患者血液中circHIPK2水平升高与焦虑和抑郁症状呈正相关，其动态变化可预测抗抑郁治疗疗效。这使circHIPK2成为一个有前景的诊断和预后生物标志物。此外，circHIPK2已成为一个潜在的治疗靶点，有证据表明肠道微生物群介导的其表达调节影响星形胶质细胞功能，从而促进抑郁症的发病机制。

其他circRNA，包括circZNF141、circRNA_103636、circFKBP8、circMBNL1和circDYM，在MDD患者中也显示表达改变，提供了新的诊断和治疗见解。值得注意的是，circDYM因其在抑郁样行为中的作用而被广泛研究。张等人证明circDYM通过靶向miR-9调节小胶质细胞活性来缓解抑郁样行为，而李等人发现它通过miR-497a-5p减轻海马神经元损伤。临床上，MDD患者中circDYM水平显著降低，并与抑郁症状严重程度相关。重要的是，重复经颅磁刺激增加了circDYM水平，并且人工囊泡介导的circDYM递送可以穿过血脑屏障发挥治疗作用。这些发现强调了circDYM在MDD治疗中的临床潜力。

如表4和图3所示，circRNA通过三种主要机制导致抑郁症：（1）激活小胶质细胞以增强炎症和促进细胞凋亡；（2）损害星形胶质细胞的结构和功能；（3）促进神经元凋亡和损害突触可塑性。总的来说，这些研究突出了circRNA在抑郁症病理中的关键调节作用。

精神分裂症

关于circRNA在SCZ中的研究仍然有限，只有少数研究探索了它们的潜在作用。仅有两个团队报告称SCZ患者大脑中circRNA存在差异表达。Mahmoudi等人在SCZ患者的背外侧前额叶皮层中鉴定出1,142个差异表达的circRNA，其中30%源自先前与SCZ相关的基因。此外，Zimmerman及其同事发现，SCZ患者前额叶皮层中circHomer1a表达显著降低，这通过改变与突触可塑性和神经系统疾病相关的基因表达，损害了认知灵活性并促进了SCZ的发展。此外，一些研究在SCZ个体的外周血中鉴定出大量差异表达的circRNA。重要的是，Yao等人验证了SCZ患者血液中circPLEKHA2的异常表达可以作为一种新型的潜在诊断和治疗生物标志物。

目前SCZ的诊断主要依赖于症状变化和精神科医生的临床经验。然而，这些主观措施可能导致误诊或漏诊。因此，有必要探索客观指标以改善SCZ的早期诊断和预后。CircRNA在外周血中相对稳定且易于检测，并表现出高度的空间、时间和组织特异性，这意味着它们有可能作为SCZ诊断和治疗的生物标志物。

目前关于circRNA在SCZ中作用的研究仍处于起步阶段，有几个关键挑战阻碍了进展。一个主要限制是缺乏特征明确的SCZ患者样本，这极大地限制了将circRNA验证为可靠诊断生物标志物或治疗靶点。为了确立circRNA在SCZ中的临床相关性，需要进行更大队列的严格临床研究和全面的实验验证。此外，当前的SCZ动物模型在重现该疾病的复杂病理生理学方面存在显著局限性，从而限制了对circRNA在SCZ发病机制中潜在机制作用的研究。因此，迫切需要更复杂的研究方法来阐明circRNA在SCZ病因和进展中的精确分子功能和调控机制。

双相情感障碍

双相情感障碍（BD）是一种严重的精神疾病，其特征是躁狂（或轻躁狂）和抑郁的反复发作，代表极端的情绪失调。新兴证据表明circRNA参与BD的病理生理学。值得注意的是，circCCNT2，一种源自细胞周期相关基因CCNT2的circRNA，在BD患者的前扣带皮层和外周血淋巴细胞中水平显著升高。有趣的是，锂盐（BD的一线情绪稳定剂）已被证明可以逆转淋巴细胞中circCCNT2的异常表达，表明其作为BD治疗中潜在的治疗生物标志物或调节剂。另一个关键的circRNA，circHomer1a，在BD患者的前额叶皮层和诱导多能干细胞来源的神经元中表现出显著下调。其表达水平与BD病程呈负相关，暗示其在疾病进展中的潜在作用。此外，在BD患者大脑中观察到源自NEBL和EPHA3基因的circRNA失调。鉴于EPHA3在记忆功能和焦虑调节中的既定作用，这些都是BD的核心临床特征，这些发现表明circRNA失调与BD症状之间存在合理的联系。

最近的研究将这些发现扩展到外周生物标志物，揭示了BD患者血液中circRNA表达谱的广泛改变。一项综合研究在BD患者的外周血中鉴定出94个显著失调的circRNA，可能形成一个内源性调控网络，涉及circRNA-miRNA-mRNA相互作用，这可能有助于BD的发病机制。支持这些观察结果，Mahmoudi等人报告了BD患者外周血中34个circRNA的显著表达变化。由于其组织特异性表达模式和在外周循环中的显著稳定性，这些circRNA已成为BD诊断生物标志物的有希望的候选者。然而，需要通过大规模、纵向研究进一步验证，以确定其临床效用并阐明其在BD病理生理学中的确切作用。

自闭症谱系障碍

自闭症谱系障碍是高度遗传的神经发育状况，其特征是社交沟通的持续缺陷和受限的、重复的行为模式，新兴证据表明失调的circRNA涉及其复杂的病因学。最近使用不同ASD动物模型的研究揭示了circRNA表达谱的实质性改变，为了解ASD的分子基础提供了新见解。在丙戊酸诱导的ASD小鼠模型中，Wang等人鉴定了1,059个差异表达的circRNA，可能涉及关键的ASD相关通路，包括TGF-β、NOTCH、MAPK和长时程抑制（LTD）信号通路。BTBR T+tf/J（BTBR）小鼠模型被认为是ASD病理生理学的有力代表，不仅重现了核心行为表型（例如，受损的社交互动、减少的超声波发声和重复的梳理行为），而且反映了人类ASD中观察到的神经发育异常和免疫生化改变。值得注意的是，在该模型中，研究人员在海马体中检测到29个上调和12个下调的circRNA，其中源自ASD相关基因Cdh9的circCdh9在多个ASD相关脑区（包括前额叶皮层和杏仁核）中显示失调。这些发现共同强调了circRNA在ASD病理中的关键作用，其失调可能反映了该疾病的多因素病因。

临床研究进一步证实了circRNA在ASD中的重要性，揭示了ASD患者关键脑区（包括前额叶皮层、颞叶皮层和小脑）中广泛且非随机的表达模式。Chen等人在死后ASD大脑中鉴定出60个异常表达的circRNA，综合多组学分析揭示了8,170个ASD相关的circRNA-miRNA-mRNA相互作用轴。这些相互作用涉及关键的ASD风险基因并编码与抑制性突触后密度相关的蛋白质，突出了circRNA在突触功能中的潜在调节作用。例如，已显示circARID1A通过其与miR-204-3p的相互作用来调节ASD相关风险基因（例如NLGN1、STAG1、HSD11B1、VIP和UBA6）。这些发现表明，ASD中的circRNA失调可能源于与遗传风险因素的复杂相互作用，共同导致该疾病的发病机制。新兴证据将circRNA定位为ASD进展中的潜在调控枢纽和预测性生物标志物。

结论与未来方向

在本综述中，我们概括了关于circRNA的最新研究，并强调了其在神经精神疾病预测、诊断和治疗中的临床意义。在过去的几十年里，在理解circRNA在改善AD、PD和应激诱导的抑郁症的疾病相关症状方面的功效取得了相当大的进展：（1）circRNA可以抑制Aβ积累，促进Aβ清除，并减轻Aβ诱导的细胞凋亡和炎症；（2）circRNA抑制细胞凋亡、炎症和α-突触核蛋白表达以维持多巴胺能神经元功能；（3）circRNA可以恢复应激诱导的小胶质细胞、星形胶质细胞和神经元功能障碍。然而，关于circRNA在BD、SCZ和其他神经精神疾病中功能的研究相对较少。

为了有效地推动circRNA走向临床应用，必须解决几个关键挑战。circRNA功能的精确分子机制，以及它们在神经精神和神经退行性疾病中的作用，仍然知之甚少。鉴于circRNA的巨大多样性，即使在单一疾病背景下也可能存在数千种不同的种类，目前尚不清楚哪些是主要驱动因素，哪些是协同作用的——这些问题需要全面和系统的研究。此外，许多现有研究受限于小样本量，限制了普适性和统计稳健性。因此，将circRNA推向临床应用需要通过超越相关性表达分析的大规模、高质量和机制驱动的研究进行严格验证。

此外，患者群体的异质性，加上circRNA表达的细胞类型特异性，需要临床样本采集的标准化方案。先进的检测技术对于这些分子的准确定量至关重要。将高通量RNA测序与灵敏方法（如HIT-scISOseq）相结合，能够实现精确的单细胞circRNA分析。其次，虽然circRNA作为治疗靶点显示出前景，但实现精确和安全的靶向仍然是一个重大挑战。基因编辑技术，如CRISPR/Cas13和RNA干扰（RNAi）技术，必须进行优化以特异性靶向circRNA，同时最小化脱靶效应。第三，开发有效的circRNA靶向工具的递送方法对其治疗潜力至关重要。RNA递送载体，如纳米颗粒和外泌体，可以减轻免疫反应相关的副作用，尽管其生产和高效递送方面仍然存在挑战。最后，利用生物信息学工具和人工智能（例如MSTCRB和CRIECNN模型）可以促进更有效和准确地分析circRNA调控的大脑功能网络，增进我们对它们在神经发育和疾病中作用的理解。