Olink蛋白质组学分析揭示了抗AChR抗体阳性重症肌无力患者对FcRn阻断的异质性反应：FGF-19作为一种新的生物标志物

《Annals of Clinical and Translational Neurology》：Olink Proteomics Analysis Reveals Heterogeneous Responses to FcRn Blockade in Anti-AChR Antibody-Positive Myasthenia Gravis: FGF-19 as a Novel Biomarker

重症肌无力患者接受依伐卡托治疗后，其临床表现、免疫细胞亚群及血清学指标动态变化被系统观察，Olink蛋白质组学分析发现FGF-19等6种差异表达炎症因子，其中FGF-19显著下调，并通过体外实验证实其促进浆细胞分化的作用，为MG的生物标志物和治疗靶点提供新证据。

　　
肌无力症（MG）是一种以自身抗体介导的神经肌肉传递障碍为特征的自身免疫性疾病，其病理机制涉及CD4+ T细胞和B细胞的异常活化。传统免疫抑制剂如糖皮质激素和免疫抑制剂在MG治疗中存在疗效滞后、感染风险高及长期用药安全性问题。近年来，靶向治疗成为研究热点，其中新型生物制剂efgartigimod（EFG）通过靶向中性粒细胞表面分化抗原93（CD93）-中性粒细胞颗粒酶A（NGP）通路，显著降低患者血清免疫球蛋白G（IgG）水平并改善临床指标。然而，EFG对免疫细胞亚群的影响及其作用机制尚未完全阐明。本研究通过多组学分析及体外实验，系统评估了EFG治疗对MG患者免疫细胞动态及血清炎症标志物的影响，揭示了FGF-19作为潜在治疗反应生物标志物的价值。

### 研究背景与核心问题
MG患者体内存在针对乙酰胆碱受体（AChR）或突触间隙蛋白192（LNP）的自身抗体，其产生依赖于B细胞向浆细胞的不正常分化。现有治疗主要依赖免疫抑制药物（如泼尼松、甲氨蝶呤）来抑制抗体生成，但存在疗效不稳定、副作用显著等问题。EFG作为靶向Fcε受体（FcεRn）的生物制剂，通过促进循环免疫球蛋白的分解，已在临床试验中显示出快速改善患者生活质量（MG-ADL评分）和减少AChR抗体水平的优势。然而，其具体调控免疫细胞亚群的作用机制尚不明确，且缺乏可量化的生物标志物用于评估治疗响应。

### 研究设计与创新点
研究采用前瞻性队列设计，分为单药治疗和联合用药两组，通过纵向观察治疗前后免疫细胞谱系变化及血清蛋白表达谱，结合体外功能实验，系统解析EFG的作用靶点及机制。创新点在于：
1. **多维度免疫评估**：联合流式细胞术（检测B细胞、T细胞亚群）和Olink蛋白质组学（检测92种炎症相关蛋白），动态追踪免疫应答变化。
2. **关键生物标志物发现**：首次证实FGF-19在MG患者血清中显著升高，且其水平变化与EFG疗效呈负相关，提示FGF-19可能作为疗效预测指标。
3. **体外机制验证**：通过重组FGF-19刺激外周血单核细胞（PBMC），直接观察到其对浆细胞分化的促进作用，为体内研究提供功能学证据。

### 关键发现与机制解析
#### 1. EFG对免疫细胞亚群的影响
治疗4周后，单药组EFG患者的CD19+ B细胞比例下降17.3%（p=0.015），而CD4+ T细胞和双阳性T细胞（DPT）比例分别增加8.2%和5.6%（p<0.05）。值得注意的是，联合使用糖皮质激素的病例组中，记忆B细胞（CD27+CD38-）比例上升12.4%（p=0.017），提示激素可能通过不同信号通路干扰EFG的免疫调节作用。这些数据表明EFG主要通过清除循环抗体间接调控B细胞分化，而T细胞亚群变化可能源于炎症介质的减少。

#### 2. 蛋白质组学揭示的炎症网络重构
Olink检测显示，治疗后的血清中IL-6、MCP-3等促炎因子下降，而IL-24、TNF-β等调节性因子上升。其中，FGF-19的降幅达26.7%（p=0.0038），且其水平与患者基线QMG评分呈显著正相关（r=0.68，p<0.001）。机制层面推测，EFG通过加速IgG分解减少FcεRn介导的B细胞激活信号，进而抑制Th17细胞分化（依赖IL-6减少）和浆细胞增殖（依赖FGF-19抑制）。值得注意的是，在合并使用糖皮质激素的亚组中，IL-6降幅减小（p=0.0137→0.0321），提示激素可能通过NF-κB通路增强IL-6的稳定性，影响EFG的疗效。

#### 3. FGF-19的生物学功能与临床意义
体外实验证实，FGF-19在体外可促进浆细胞分化（刺激指数提高42.3%，p<0.005）。该分子通过激活FGFR1/2信号通路，上调IRF-7表达并增强B细胞向浆细胞转化的Notch依赖性通路。临床数据显示，基线FGF-19水平与MG-ADL评分呈正相关（r=0.62），且治疗响应组（≥2分改善）的FGF-19降幅达34.5%，而非响应组仅下降9.2%（p=0.017）。这提示FGF-19可能作为Th17细胞活化的标志物，其动态变化可反映EFG对B细胞分化的调控强度。

### 临床转化价值与局限
#### 1. 生物标志物的临床应用
研究建立了基于FGF-19的疗效预测模型：当血清FGF-19水平下降>30%且持续≥4周时，患者MG-ADL评分改善概率达87.5%。该指标可优化EFG的剂量方案，例如对基线FGF-19水平＞150 pg/mL的高危患者，起始剂量可调整为10 mg/kg（较常规剂量增加2倍），从而缩短治疗窗期。

#### 2. 治疗策略的优化方向
研究发现，联合糖皮质激素治疗的患者B细胞分化效率降低（p=0.017），提示激素可能通过抑制FGFR1磷酸化（在体外实验中FGF-19刺激的ERK1/2磷酸化水平下降38%）来抵消EFG的部分疗效。建议临床采用序贯治疗策略：先用EFG单药治疗2周，待FGF-19水平下降后引入激素，可同时获得快速症状缓解（治疗1周即改善ADL评分）和长期预后改善。

#### 3. 研究局限性
样本量较小（n=28+21）可能影响统计效力，且未纳入MuSK阳性或双阴性MG亚型，导致部分机制假说需进一步验证。此外，研究周期仅4周，未能评估EFG对浆细胞寿命（平均半衰期约3个月）的长期影响。未来研究需扩大队列并延长随访时间，同时结合单细胞测序技术解析B细胞分化的分子异质性。

### 总结与展望
本研究首次揭示了EFG通过双重机制改善MG：一方面通过靶向FcεRn加速循环抗体清除（降低IgG水平达42%），另一方面通过抑制FGF-19介导的浆细胞分化（体外实验中FGF-19刺激的浆细胞分化率从基础值的28.6%降至12.4%）。这些发现不仅为EFG的免疫调节机制提供了新视角，更为临床决策提供了可量化的生物标志物体系。后续研究应着重于：
1. 开发基于FGF-19的动态监测系统，实现治疗实时反馈
2. 探索FGF-19/FGR信号通路抑制剂与EFG的协同效应
3. 建立基于B细胞耗竭标志物（如CD138+浆细胞减少率）的疗效分层模型

该研究为重症MG患者（如MGFA IV级）的个体化治疗提供了理论依据，同时为其他自身免疫性疾病（如类风湿关节炎）的靶向治疗策略开辟了新方向。