在缺乏瞬时受体电位香草酸型1（TRPV1）通道的小鼠中，2-肾-1-夹式高血压并未得到缓解

《Frontiers in Physiology》：2-Kidney-1-clip hypertension is not attenuated in mice lacking the transient receptor potential vanilloid type 1 (TRPV1) channel

TRPV1基因敲除小鼠中肾血管性高血压未受影响，揭示物种差异及非TRPV1通道的可能作用。

　　
研究团队针对TRPV1通道在小鼠肾血管高血压模型中的作用进行了系统性探索。实验分为两个核心部分：首先通过神经追踪和免疫荧光技术定量分析小鼠肾感觉神经元中TRPV1的表达比例；其次在2K1C手术模型中比较野生型与TRPV1基因敲除小鼠的血压调控机制差异。

在神经解剖学研究中，实验团队采用逆行追踪标记法结合AlexaFluor 647荧光探针定位肾感觉神经元。结果显示，术后18-21天，T10-L2节段背根神经节（DRG）内可逆行标记的肾神经节细胞数量与假手术组无显著差异。免疫荧光检测显示约60%的肾感觉神经元表达TRPV1通道蛋白，该比例显著低于已发表的啮齿类动物研究数据（约85%在同类实验中观察到）。值得注意的是，IB4标记的非肽能神经元与TRPV1共表达的细胞比例在两组间均未呈现统计学差异。

该发现提示TRPV1可能在小鼠肾神经节细胞中仅作为辅助性受体存在。实验通过比较肾动脉钳（2K1C）术后不同遗传背景小鼠的血压变化，评估TRPV1通道在高血压形成中的贡献。结果显示，野生型与TRPV1基因敲除小鼠在术后第2天均出现收缩压（SBP）和舒张压（DBP）的显著升高，且维持时间与野生型无统计学差异。每日平均动脉压（ABP）在野生型组（133±5 mmHg）与TRPV1敲除组（128±6 mmHg）间未发现显著差异（p>0.05）。神经节后阻断实验进一步验证了这一结论，两组在氯 iso sensamine（4 mg/kg）诱导的降压反应幅度上未呈现显著差异。

实验还特别考察了性别差异的影响。在雄性小鼠中，TRPV1敲除组基础心率（HR）较野生型低8±2次/分（p<0.01），但术后心率的性别间差异未达显著水平。雌性实验组中，野生型与TRPV1敲除组在ABP、HR等指标上均未显示统计学差异。值得注意的是，术后肾脏质量的显著减少（约40%）在两组间完全一致，提示肾血管钳引起的血流动力学改变可能独立于TRPV1通道的活性状态。

讨论部分深入分析了物种差异的可能机制。研究指出，TRPV1在感觉神经元中的表达比例存在显著的物种特异性，人类与大鼠的TRPV1阳性神经元比例（85%以上）显著高于小鼠（60%）。这种差异可能源于不同物种中神经肽受体复合体的组成差异，例如TRPV1常与钙调蛋白相关激酶（CaMKII）或瞬时受体电位香草酸亚型1（TRPV1）形成异源二聚体，但在小鼠中尚未发现此类复合物。

实验还探讨了TRPV1通道介导的神经信号传导路径。尽管化学消融技术（如外周应用高浓度辣椒素）在啮齿类动物中已证实可有效破坏TRPV1阳性神经元的信号传导，但本实验发现敲除TRPV1并未改变术后神经节后阻滯实验中的降压幅度，提示可能存在其他代偿性信号通路。例如，在TRPV1阴性神经元中可能存在其他瞬时受体电位通道（如TRPV4、TRPV6）或离子通道（如 Nav1.8、Nav1.7）介导的信号传导。

研究团队进一步排除了性别差异的影响。通过分析雄性与雌性样本，发现TRPV1敲除组在术后14-22天的心率降低现象与野生型组存在显著差异（p<0.01），但这一差异未在血压参数中体现。这提示性别因素可能通过影响心率反射间接影响血压调控，而TRPV1通道在此过程中可能不起主导作用。

在技术方法学层面，研究采用改进的逆行追踪标记技术，通过3次递进式注射（每次500 nL）确保肾神经节细胞标记的完整性。免疫荧光实验中创新性地结合了双标记检测（WGA-647与TRPV1抗体联用），并引入IB4标记物区分肽能神经元与非肽能神经元。定量分析采用双盲独立计数法，并通过细胞直径测量（10-29 μm范围）验证了神经节细胞的成熟度。

实验设计的严谨性体现在多维度验证体系：1）采用野生型与基因敲除 littermates 排除遗传背景干扰；2）通过心率监测和神经节后阻断实验双重验证交感神经激活状态；3）结合组织形态学（肾质量测量）与血流动力学参数（ABP、PP等）进行综合评估。值得注意的是，尽管术后肾脏质量减少达40%，但血压升高的幅度未显示相关性，提示可能存在其他代偿机制。

研究结论挑战了传统认知，提示TRPV1通道在小鼠肾血管高血压中的贡献有限。可能的解释包括：1）TRPV1在肾神经节中仅作为辅助受体参与信号传导；2）存在其他TRPV家族成员（如TRPV4）或相关离子通道（如HCN通道）介导的神经信号；3）TRPV1阴性神经元可能通过其他机制（如牵张感受器或化学感受器）参与血压调控。该发现对临床转化具有指导意义，提示针对TRPV1通道的降压策略可能需要联合其他离子通道靶向治疗。

研究同时揭示了小鼠与大鼠在TRPV1介导的神经调控机制上的关键差异。前期研究显示，在2K1C高血压模型中，大鼠TRPV1敲除组血压显著低于野生型（Stocker and Sullivan, 2023），而本实验中小鼠未呈现类似效应。这种物种特异性差异可能源于：1）TRPV1在感觉神经元中的表达比例差异（60% vs 85%）；2）神经肽分布特征不同（如 CGRP 在大鼠肾神经节中表达量更高）；3）信号传导通路中其他蛋白的协同作用（如 PKCε 在TRPV1信号转导中的调节作用）。

未来研究可聚焦于以下方向：1）开发TRPV1条件性敲除系统，区分先天性与后天性TRPV1缺失的差异；2）采用多模态检测技术（如钙成像、双光子显微镜）实时观测肾神经节细胞电活动；3）深入解析TRPV1阴性神经元中的其他离子通道（如TRPV4、Tetrodotoxin-resistant sodium channels）的潜在作用。这些研究将有助于建立更精确的动物模型，为开发靶向肾神经信号通路的抗高血压药物提供理论依据。