肌肉浸润性膀胱癌中的POLQ和DNA-PK抑制作用

《Die Pathologie》：POLQ and DNA-PK inhibition in muscle-invasive bladder cancer

本研究通过体外实验分析DNA-PK和POLQ抑制剂对移行性膀胱癌（MIBC）中尿路上皮癌（UC）和鳞状细胞癌（SCC）的放疗增敏效果。结果显示DNA-PK抑制剂显著降低细胞存活率（IC50减少74-99%）并延迟DNA修复，而POLQ抑制剂效果较弱。

　　

摘要

背景

肌浸润性膀胱癌（MIBC）包括尿路上皮癌（UC）等组织学亚型，以及较为罕见且预后较差的鳞状细胞癌（SCC）。标准治疗方法是根治性膀胱切除术，而对于鳞状细胞癌，化疗或放疗等替代疗法的效果尤为有限。诸如DNA依赖性蛋白激酶（DNA-PK）和DNA聚合酶θ（POLQ）抑制剂之类的放射增敏剂，能够选择性地增强肿瘤细胞对放疗的敏感性，为临床应用提供了有前景的途径。

目的

本研究在源自患者的MIBC细胞系（包括UC和SCC亚型）中，分析了DNA-PK和POLQ抑制剂在体外条件下的放射增敏效果。

材料与方法

在体外实验中，使用DNA-PK抑制剂AZD7648（DNA-PKi）和POLQ抑制剂ART558（POLQi）对源自患者的鳞状细胞癌（p-SCC；n=3）和尿路上皮癌（p-UC；n=3）细胞株进行了测试。通过XTT细胞活力测定（IC50）、克隆生存实验、γH2AX免疫荧光和彗星实验等方法，评估了这些抑制剂与电离辐射（IR）联合使用时的效果。

结果

DNA-PKi在体外显著增强了MIBC细胞的放射敏感性，使IC50-XTT值降低了74–99%，生存率降低了34–64%。在POLQi+2Gy的条件下，IC50降低了7–13%；而在POLQi+8Gy的条件下，IC50反而增加了11–24%，但生存率仅降低了约5%。DNA-PKi显著延缓了DNA修复过程（彗星尾长度增加了38–40%，γH2AX焦点增加了11.9–13.1倍），而POLQi的影响较小（彗星尾长度增加了22–33%，γH2AX焦点增加了5.4–6.0倍）。

结论

与POLQi相比，DNA-PKi对MIBC细胞的放射增敏效果更显著，尤其是对鳞状细胞癌（SCC）。因此，DNA损伤修复（DDR）抑制剂在MIBC治疗中具有潜在疗效，具体效果取决于目标蛋白和肿瘤亚型。