转录因子7样2、长链非编码RNA ANRIL和CYP2C19 * 17基因变异与脑卒中易感性的分子关联研究

《Cellular and Molecular Neurobiology》：Comprehensive Molecular Evaluation of Transcription Factor 7-like 2, Long Noncoding RNA (ANRIL), and CYP2C19*17 Gene Variants and Their Association with Predisposition and Progression in Stroke Patients

本研究针对脑卒中这一全球性健康问题，探讨了ANRIL rs1333045 C>T、CYP2C19 * 17(rs12248560)C>T和TCF7L2 rs12255372 G>T基因多态性与沙特人群脑卒中易感性的关联。研究人员采用ARMS-PCR技术对100例患者和100例对照进行基因分型，发现上述基因的特定基因型和等位基因均显著增加脑卒中风险。该研究为脑卒中的早期预警和个体化防治提供了新的分子靶点。

　　

脑卒中作为全球第二大死亡原因，在沙特阿拉伯的发病率呈持续上升趋势，已成为严峻的公共卫生挑战。尽管传统风险因素如高血压、糖尿病等已被广泛认知，但遗传因素在脑卒中发生发展中的作用机制仍有待深入探索。近年来，基因组学研究的突破性进展为揭示脑卒中的遗传基础提供了新视角，特别是长链非编码RNA和代谢酶基因多态性可能通过调控血管生物学过程影响疾病易感性。

在这项发表于《Cellular and Molecular Neurobiology》的研究中，Abdullah Hamadi等研究者将目光投向了三个关键基因位点：9p21染色体区域的长链非编码RNA ANRIL（INK4位点反义非编码RNA）、转录因子TCF7L2（转录因子7样2）和细胞色素P450酶CYP2C19 * 17。这些基因分别参与血管内皮功能、炎症反应和药物代谢等重要生理过程，但其多态性与沙特人群脑卒中的关联尚未明确。

研究人员采用病例对照研究设计，纳入100例经临床确诊的脑卒中患者和100例人口学特征匹配的健康对照。所有参与者均为沙特阿拉伯塔布克地区的阿拉伯裔居民，排除了合并其他慢性疾病者，以确保研究结果的可靠性。通过专业的神经影像学检查（包括磁共振成像和计算机断层扫描）结合血液生物标志物检测，严格确认脑卒中的诊断。

关键技术方法包括：使用ARMS-PCR（扩增阻滞突变系统PCR）进行基因分型技术，该技术能够准确区分ANRIL rs1333045 C>T、TCF7L2 rs12255372 G>T和CYP2C19 * 17 rs12248560 C>T等单核苷酸多态性的不同基因型；通过凝胶电泳验证PCR产物；采用多变量逻辑回归分析评估基因型与脑卒中风险的关联，并调整年龄、血脂等混杂因素的影响。

demographic Characteristics of Study Participants

研究发现脑卒中患者组的平均年龄（57.33±10.39岁）显著高于对照组（35.39±12.93岁），符合年龄是脑卒中重要风险因素的共识。在生化指标方面，患者组的糖化血红蛋白（6.07±0.429%）、总胆固醇（178.16±54.07 mg/dL）、低密度脂蛋白（148.8±35.8 mg/dL）和甘油三酯（162.16±38.17 mg/dL）水平均显著升高，而高密度脂蛋白（26.87±4.33 mg/dL）则显著降低，这些发现与脑卒中的代谢危险因素特征一致。

Genotypic and Alleles Distribution of TCF7L2-rs12255372G>T, Long Noncoding RNA(ANRIL-rs1333045A>C),and CYP2C19 * 17 C>T Gene Variations in Cases and Controls

基因分布分析显示，三个基因的多态性在病例和对照组间均存在显著差异。ANRIL rs1333045 TT基因型在脑卒中组中的频率为50%，显著高于对照组的30%；T等位基因频率在病例组中也显著升高（0.63 vs 0.49）。CYP2C19 * 17 CT和TT基因型在病例组的分布频率分别为30%和9%，而对照组仅为18%和3%。TCF7L2 rs12255372 GT和TT基因型在病例组的频率分别为49.50%和10.89%，明显高于对照组的35%和5%。

Logistic Regression Analysis of Long Noncoding RNA rs1333045 C>T Genotypes to Predict the Risk of Stroke

多因素逻辑回归分析表明，在隐性模型下，ANRIL rs1333045 TT基因型携带者的脑卒中风险显著增加（OR=2.33，95%CI：1.3062-4.1681，P<0.004）。等位基因分析显示T等位基因是脑卒中的危险因素（OR=1.73，95%CI：1.1655-2.5890，P=0.0067）。这些关联在调整多重比较后仍然显著。

Relationship Between the Genotypes of LncRNArs1333045 and the Clinical and Demographic Characteristics of Stroke Patients

进一步分析发现ANRIL基因多态性与特定临床特征相关。在脑卒中患者中，女性携带CT基因型的频率高于男性（P=0.014）。年龄大于50岁的患者中TT基因型频率显著高于年轻患者（P=0.0064）。此外，该多态性与胆固醇水平（P=0.0053）和甘油三酯水平（P=0.002）也存在显著关联，提示ANRIL可能通过影响脂质代谢参与脑卒中发病。

Regression Analysis of CYP2C19 * 17C>T Genotypes to Predict the Risk of Stroke

对于CYP2C19 * 17多态性，显性模型分析显示（CT+TT）基因型组合与脑卒中风险显著相关（OR=2.44，95%CI：1.3052-4.5810，P=0.005）。T等位基因携带者的风险增加2.34倍（95%CI：1.3727-4.0117，P=0.0018）。该基因多态性同样与高龄（P=0.038）、高胆固醇（P=0.008）和高甘油三酯（P=0.004）等危险因素相关。

Logistic Regression Analysis of Transcription Factor 7-like 2rs12255372 G>T Genotypes to Predict the Risk of Stroke

TCF7L2 rs12255372多态性分析显示，GT基因型携带者的脑卒中风险最高（OR=2.14，95%CI：1.1893-3.8610，P=0.011），而TT基因型也呈现显著风险增加（OR=3.00，95%CI：1.0657-10.2189，P=0.038）。显性模型中（GT+TT）基因型组合的风险比为2.28（95%CI：1.3003-4.0242，P=0.004）。T等位基因频率在病例组中显著高于对照组（0.36 vs 0.22）。

Association Between Stroke Patients and TCF7L2-rs12255372 G>T Genotype

TCF7L2多态性与临床特征的关联分析表明，该基因型分布存在性别差异（P=0.048），男性患者中GT基因型频率较高。同时，该多态性与胆固醇水平（P=0.036）、低密度脂蛋白（P=0.031）和甘油三酯（P=0.024）均存在显著关联，进一步支持TCF7L2在脂质代谢和脑卒中风险中的作用。

Multivariate Association with Stroke Risk

多变量分析在调整年龄、血脂等混杂因素后，确认TCF7L2 rs12255372 GT基因型与脑卒中风险独立相关（OR=8.59，95%CI：1.45-53.2，P=0.017）。年龄（OR=1.16，P<0.001）和各项血脂指标（胆固醇、低密度脂蛋白、极低密度脂蛋白和甘油三酯）均为脑卒中的独立预测因素。

研究结论部分强调，ANRIL、CYP2C19 * 17和TCF7L2基因多态性首次在沙特人群中被证实与脑卒中易感性相关。这些基因分别通过调节血管炎症、脂质代谢和药物代谢等途径影响动脉粥样硬化进程，而动脉粥样硬化正是缺血性脑卒中的主要病理基础。值得注意的是，本研究发现的基因-血脂交互作用提示这些遗传变异可能通过调制代谢途径加剧脑血管病变。

这项研究的创新点在于首次系统评估了这三个功能相关基因多态性在沙特人群脑卒中中的综合作用，并揭示了它们与传统风险因素的交互效应。ARMS-PCR技术的应用为资源有限环境的遗传筛查提供了实用方案。研究结果对脑卒中的早期预警、风险分层和个体化预防具有重要转化价值，特别是为开发针对特定遗传背景的干预策略提供了分子依据。

然而，研究者也坦承研究的局限性，包括单中心设计、样本量相对较小以及未充分考虑环境生活方式因素的影响。未来的大样本多中心研究和功能实验将有助于验证这些发现，并阐明这些基因多态性影响脑卒中发病的具体分子机制。