Pax6 与 NF-κB DNA 动机序列结合，并调控 LPS 处理的小鼠大脑中参与 NF-κB 激活的基因

《Molecular Neurobiology》：Pax6 Binds to NF-κB DNA Motif and Regulates Genes Involved in NF-κB Activation in the Brains of LPS-Treated Mice

Pax6通过调控NF-κB信号通路抑制TLR4介导的神经炎症，实验证实Pax6与NFκB1、RelA及Tlr4、Tab2、Tank等基因的调控序列存在结合位点，并影响其表达水平。

　　

摘要

脂多糖（LPS）会激活依赖Toll样受体4（TLR4）的信号传导级联反应，导致NF-κB向细胞核内迁移。NF-κB是一种关键的转录因子，可调节包括Tnfα在内的促炎基因的表达。然而，在神经炎症的调控过程中，NF-κB及其他转录因子的具体作用机制尚不明确。本报告旨在探讨Pax6对TLR4依赖性神经炎症的影响。通过使用抗Pax6抗体进行染色质免疫沉淀（ChIP）分析，并结合测序和基序分析，研究人员识别出了相关调控序列元素。此外，还通过ChIP-qPCR技术以及半定量PCR和Western blotting方法检测了对照组和LPS处理小鼠大脑中Pax6结合基因的表达情况。通过在N2a细胞系中利用siRNA介导Pax6的敲低或过表达实验，评估了Pax6对与NF-κB介导的炎症反应相关基因的影响。研究表明，Pax6和NF-κB（NFκB1及RelA）在调控序列元素上具有多个结合位点，这一点也通过测序得到了验证。分析还发现Pax6能够结合NF-κB的共有DNA基序，以及Tlr4、Tab2和Tank的调控序列元素。ChIP-qPCR结果显示，Pax6在NFκB1、RelA和Tab2的启动子序列元素上的结合能力增强，但在Tlr4上的结合能力减弱。Pax6、NFκB1、RelA、Tlr4、Tab2、Tank以及NF-κB诱导基因Tnfα的表达也发生了变化。总体而言，这些发现表明Pax6可能通过调节NF-κB发挥抗炎作用。