Orexin-A通过Orexin受体1/Nuclear Factor Erythroid 2-Related Factor 2信号通路抑制神经元铁死亡，从而减轻创伤性脑损伤

《Molecular Neurobiology》：Orexin-A Mitigates Traumatic Brain Injury by Inhibiting Neuronal Ferroptosis Through Orexin Receptor 1/Nuclear Factor Erythroid 2-Related Factor 2 Signaling Pathway

创伤性脑损伤（TBI）中OXA通过OX1R/Nrf2信号通路抑制铁死亡并改善神经功能。动物实验显示OXA降低mNSS评分，改善抓力测试，减少血脑屏障破坏和神经元损伤，同时抑制氧化应激，上调OX1R、HO-1及铁死亡相关标志物SLC7A11、GPX4，促进Nrf2核转位。细胞实验证实OXA逆转Erastin诱导的PC12细胞毒性及线粒体损伤，阻断OX1R或Nrf2显著削弱其保护作用。摘要分隔符：

　　

摘要

创伤性脑损伤（TBI）会导致神经功能障碍，部分原因是神经元发生铁死亡（ferroptosis）。尽管食欲素-A（OXA）能够减轻TBI引起的铁死亡和功能损伤，但其具体机制仍不明确。我们通过体外和体内实验研究了OXA是否通过食欲素受体1（OX1R）/核因子红系2相关因子2（Nrf2）信号通路发挥神经保护作用。我们使用改良的Feeney方法建立了大鼠TBI模型，并结合Erasstin处理的PC12细胞铁死亡模型进行实验。通过脑室内注射OX1R抑制剂和腹腔注射Nrf2抑制剂来明确该信号通路的作用机制。神经功能通过改良的神经损伤评分（mNSS）和倒置筛选测试（IST）进行评估。病理和分子层面的分析包括Evans blue染色、苏木精-伊红染色、Fluoro-Jade B染色、CCK-8检测、细胞迁移实验、透射电子显微镜观察、生化检测、Western blot、定量聚合酶链反应（PCR）和免疫荧光技术。在TBI大鼠模型中，OXA给药显著降低了mNSS评分，延长了IST中的抓握潜伏期，并减轻了血脑屏障的破坏和神经元损伤。OXA抑制了氧化应激，上调了OX1R和HO-1蛋白的表达，提高了与铁死亡相关的标志物（SLC7A11和GPX4）的水平，并促进了Nrf2向细胞核的转移。在体外实验中，OXA能够拮抗Erasstin对PC12细胞的细胞毒性，改善线粒体损伤，并恢复SLC7A11和GPX4的水平。值得注意的是，当阻断OX1R或Nrf2时，OXA的神经保护作用显著减弱。综上所述，OXA通过激活OX1R/Nrf2信号通路来缓解神经缺陷、保护血脑屏障完整性、减轻氧化应激并抑制TBI后的神经元铁死亡。这些发现为针对TBI中的铁死亡机制提供了新的治疗思路。