嗅神经母细胞瘤中EZH2表达和活性的基因组与免疫相关性研究

《Head & Neck》：Genomic and Immune Correlates of EZH2 Expression and Activity in Olfactory Neuroblastoma

评估嗅神经母细胞瘤（ONB）中EZH2甲基转移酶活性与免疫微环境特征的关系，发现低EZH2活性（高ERS评分）的肿瘤表现出更高免疫浸润（T细胞、巨噬细胞、B细胞）和促炎通路激活，提示可能对免疫治疗和MAPK抑制剂更敏感。

　　这项研究探讨了嗅觉神经母细胞瘤（ONB）中增强子锌指同源物2（EZH2）的表达与活动对肿瘤免疫特征的影响。ONB是一种罕见的鼻窦鼻腔恶性肿瘤，其神经内分泌特性使其在复发和转移状态下具有有限的系统性治疗选择，且目前对免疫治疗的响应机制了解甚少。EZH2作为表观遗传修饰酶聚复合物2（PRC2）的核心蛋白，其作用机制涉及对组蛋白H3第27位赖氨酸的甲基化（H3K27me3），从而调控细胞周期、促进细胞自我更新并抑制分化。在多种癌症中，EZH2的过表达与肿瘤侵袭性、化疗耐药性和不良预后密切相关。然而，EZH2的抑制却能增强T细胞介导的杀伤作用，并提高对免疫检查点抑制剂的敏感性。因此，本研究旨在评估ONB中EZH2的表达和活动水平，并探讨其与免疫特征之间的潜在联系。

研究团队分析了36例真实世界ONB患者的分子数据，这些样本来自Caris Life Science实验室的集中化检测平台。为了推断EZH2甲基转移酶的活动水平，研究采用了一种称为EZH2基因沉默签名（ERS）的评分系统。通过将样本分为ERS低和ERS高两个亚组，研究人员可以间接判断EZH2的活动水平。此外，他们还利用转录组数据计算了T细胞炎症（TCI）评分和丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶（MAPK）通路激活评分（MPAS），这两种评分分别用于预测对免疫检查点抑制剂和酪氨酸激酶抑制剂的治疗反应。研究还通过分析肿瘤来源的bulk RNA测序数据，推断了肿瘤免疫微环境的组成情况，并进一步比较了ERS低与ERS高ONB之间的免疫学差异。

研究结果显示，在ERS高亚组的ONB中，免疫相关基因的表达水平显著升高，T细胞炎症肿瘤的比例也明显增加，同时存在更丰富的炎症通路富集现象。此外，ERS高组的肿瘤显示出更高的巨噬细胞、B细胞以及CD8+ T细胞浸润水平。这些结果表明，低EZH2活动可能与更具免疫反应性的肿瘤微环境相关。同时，ERS高组还表现出更高的MPAS评分，这可能意味着这些肿瘤对MAPK抑制剂具有更高的敏感性。这些发现不仅在当前研究中得到了验证，也在一个独立的ONB数据集中得到了支持。

进一步分析显示，ERS评分与T细胞炎症评分和MAPK通路激活评分之间存在显著的正相关性，这提示EZH2的活动水平可能对肿瘤的免疫特性产生重要影响。同时，研究还发现，在ONB中，EZH2的表达与TMB或MSI-H等传统免疫治疗相关生物标志物之间并无显著关联，这表明EZH2的活动可能通过不同的机制影响免疫反应。此外，研究还探讨了SWI/SNF染色质重塑复合体在调节EZH2/PRC2活动中的作用。虽然在当前ONB队列中未发现SMARCB1（INI1）的突变，但部分样本中存在SMARCA4和ARID1A等SWI/SNF相关基因的突变，这些突变可能在肿瘤的进展中起到一定作用。

在免疫微环境的分析中，研究发现ERS高组的肿瘤显示出更高的M2型巨噬细胞比例，以及较低程度的B细胞和CD8+ T细胞浸润。尽管整体而言，ONB的免疫浸润水平较低，但低EZH2活动似乎有助于促进免疫细胞的浸润，从而可能提高对免疫治疗的响应可能性。这一现象在多个独立的分析中得到了支持，尤其是在Classé等人的研究中，通过公开数据集进行的验证也显示了类似的结果。这些结果提示，EZH2的活动水平可能是预测ONB对免疫治疗反应的一个重要指标。

值得注意的是，EZH2的抑制作用在不同类型的癌症中可能表现出不同的效果。例如，在乳腺癌模型中，EZH2抑制剂的使用会导致M2型巨噬细胞的极化和浸润增加，而EZH2的基因敲低则表现出相反的结果。这可能与EZH2的非酶活性（如调控CCL2等促M2型巨噬细胞趋化因子）有关，而非直接的甲基转移酶抑制。尽管如此，这种M2型巨噬细胞的增加可能对免疫治疗的疗效产生不利影响，因为它可能促进免疫抑制环境的形成。

此外，研究还发现，MPAS评分在ERS高组的肿瘤中显著升高，这表明这些肿瘤可能对MAPK抑制剂具有更高的敏感性。这种评分机制的建立基于对多种癌细胞系的转录组数据的分析，它能够预测对酪氨酸激酶抑制剂的反应。这一发现为ONB的治疗策略提供了新的思路，即通过调节EZH2的活动水平，可能能够增强对免疫检查点抑制剂或MAPK抑制剂的治疗效果。

研究的局限性主要包括缺乏详细的临床注释，无法将EZH2的活动水平与肿瘤分级或治疗结果直接相关联。此外，所使用的ERS评分系统是在前列腺癌中基于间接EZH2抑制方法建立的，而未使用针对EZH2的特异性酶活性抑制剂（如tazemetostat）。因此，这一评分系统的适用性在ONB中仍需进一步验证。另外，由于研究基于bulk RNA测序数据的解卷积分析，未涉及空间分辨率数据，也无法通过免疫组化（IHC）验证EZH2蛋白表达与ERS评分及免疫相关特征之间的关系。

综上所述，本研究首次揭示了ONB中EZH2的活动水平与免疫特征之间的潜在联系。低EZH2活动可能与更具免疫反应性的肿瘤微环境相关，这为未来探索EZH2抑制剂与免疫检查点阻断剂的联合治疗提供了理论依据。然而，这些发现仍需通过进一步的体外和功能研究，特别是通过IHC验证，以确认其在临床实践中的应用价值。此外，随着EZH2抑制剂在其他癌症类型中的临床试验进展，如尿路上皮癌、侵袭性B细胞淋巴瘤和非小细胞肺癌，未来可能开发出更有效的联合治疗方案，以提高ONB患者的治疗反应率和生存率。这些研究不仅有助于加深对ONB生物学行为的理解，也为个性化治疗策略的制定提供了新的方向。