α病毒糖蛋白酰化关键酶DHHC11的发现：广谱抗病毒治疗新靶点

《Cell Reports》：DHHC enzymes in alphavirus glycoprotein acylation: A target for broad-spectrum antiviral therapy

本研究针对α病毒糖蛋白酰化机制不清、缺乏广谱抗病毒药物的难题，通过以盖塔病毒（GETV）为模型，系统解析了E1和E2糖蛋白的时空动态酰化规律，发现高尔基体定位的酰基转移酶DHHC11对E2蛋白Cys415/416位点的酰化是病毒出芽的关键。敲低DHHC11可显著抑制多种α病毒的复制，为开发宿主靶向抗病毒疗法提供了新策略。

　　

α病毒是一类由蚊虫传播的病原体，其引发的疾病如基孔肯雅热（CHIKV）和东方马脑炎（EEEV）对全球公共卫生构成严重威胁。尽管疫苗研发取得进展，但目前尚无获批的抗α病毒特效药物。病毒包膜糖蛋白E1和E2的酰化（S-acylation）修饰对病毒感染至关重要，但这一过程的分子机制及其靶向价值尚不明确。

为解决这一问题，研究团队以盖塔病毒（GETV）为模型，综合运用酰化位点突变、酰基-聚乙二醇交换（APE）和酰基-生物素交换（ABE）技术、伪病毒（PVs）感染实验、CRISPR/Cas9基因敲除、免疫共沉淀及亚细胞分级等关键技术，系统阐明了α病毒糖蛋白酰化的时空动态规律及其功能。

研究结果

1. E1和E2蛋白的区室化及依赖性酰化

研究发现，E1的Cys433位点在內质网（ER）发生棕榈酰化，而E2的四个半胱氨酸位点（Cys385、Cys395、Cys415、Cys416）呈现分步修饰模式：Cys385在ER酰化，其余三位点在高尔基体依次修饰，且Cys415与Cys416的酰化存在严格相互依赖。

2. 酰化修饰对病毒复制的影响

E1 Cys433酰化缺陷（E1-S突变）使病毒进入效率降低50%，但不影响出芽；而E2 Cys415/416位点突变则完全阻断病毒出芽，导致感染性病毒颗粒无法产生。

3. 酰化介导胆固醇招募且不依赖脂筏

酰化缺陷病毒颗粒的胆固醇含量显著下降，但E1/E2蛋白并未富集于去垢剂抗性膜（DRMs），表明α病毒通过非经典脂筏途径招募胆固醇。

4. DHHC酶筛选与功能验证

siRNA文库筛选发现，DHHC11是E2 Cys415/416酰化的关键酶，定位于高尔基体。敲低DHHC11可抑制GETV复制，且DHHC11敲除细胞中多种α病毒（如SFV、RRV、ONNV等）的复制均显著受阻。

结论与意义

本研究首次揭示了α病毒糖蛋白酰化的时空动态规律，鉴定出DHHC11作为调控病毒出芽的关键宿主因子。由于E2 Cys415/416位点在α病毒中高度保守，靶向DHHC11可有效抑制多种病原体的复制，为开发宿主导向的广谱抗病毒药物提供了新思路。该策略有望克服病毒耐药性难题，提升对新兴α病毒疫情的防控能力。