抑制T细胞浸润及可溶性TNF信号在α-突触核蛋白过表达帕金森病小鼠模型中的神经保护作用

《npj Parkinson's Disease》：Inhibition of T cell infiltration and soluble TNF signaling is neuroprotective in the alpha-synuclein overexpressing mouse model of Parkinson’s disease

本研究聚焦帕金森病（PD）神经炎症调控新策略。研究人员通过AAV9介导的α-突触核蛋白（aSyn）过表达构建小鼠PD模型，发现CD4+ T细胞向Th1（IFN-γ+TNF-α+）表型极化浸润中脑。采用芬戈莫德（FTY720）阻断T细胞迁移或XPro1595抑制可溶性TNF信号，在慢性模型中显著改善运动功能并保护多巴胺能神经元，为免疫调节疗法提供新依据。

　　

当大脑黑质中的多巴胺能神经元开始神秘死亡，帕金森病的魔爪便悄然伸向人类。这种神经退行性疾病不仅导致震颤、僵硬等运动症状，更伴随有α-突触核蛋白（aSyn）的异常聚集——这些错误折叠的蛋白如同分子级联反应的导火索，引发神经炎症的燎原之火。尽管科学家早已发现患者脑内存在免疫细胞浸润和炎症因子风暴，但免疫系统究竟如何参与多巴胺能神经元退变，仍是未解之谜。

在这项发表于《npj Parkinson's Disease》的研究中，西班牙纳瓦拉大学Maria S. Aymerich团队将目光投向适应性免疫反应。他们创新性地利用腺相关病毒AAV9精准操控aSyn在黑质致密部（SNpc）的表达水平，构建出急性和慢性两种帕金森病小鼠模型，如同设置不同速率的神经退变时间轴。令人惊讶的是，流式细胞术检测发现CD4⁺ T细胞特异地向中脑区域聚集，并极化为产生IFN-γ和TNF-α的Th1效应细胞。这些免疫细胞如同特洛伊木马，通过脑室脉络丛和血管周隙等通道潜入脑实质，而血脑屏障却保持完整——暗示着趋化因子信号才是引导它们迁徙的隐形地图。

研究团队进一步施展免疫调控魔法：用多发性硬化症治疗药物芬戈莫德（FTY720）将淋巴细胞囚禁于淋巴器官，或使用XPro1595这把分子剪刀特异性剪断可溶性TNF（sTNF）与受体的对话。在慢性进展模型中，这两种策略均成功改善小鼠在杆测试和横杆测试中的运动协调性，并让黑质中的酪氨酸羟化酶（TH）阳性神经元数量得以保全。尤为关键的是，两种治疗都显著降低了中脑CD4⁺ T细胞浸润——提示免疫细胞与神经元死亡之间存在直接因果联系。

技术方法上，研究采用双侧立体定位注射AAV9-Syn至小鼠黑质，通过杆测试和横杆测试评估运动行为；利用免疫组化与无偏立体学计数TH⁺神经元；通过流式细胞术分析中脑和纹状体免疫细胞浸润；采用伊文思蓝检测血脑屏障通透性。

Alpha-synuclein依赖性神经元退变促进特异性Th1 CD4 T细胞向脑实质浸润

通过AAV9-Syn高剂量注射诱导急性病变时，流式细胞术显示中脑和纹状体中CD4⁺ T细胞比例显著增加，且极化为IFN-γ⁺TNF-α⁺的Th1表型。免疫组化证实CD3⁺和CD4⁺ T细胞在脑实质中聚集，但血脑屏障完整性未受损。

调控T细胞浸润和抑制可溶性TNF作为预防黑质纹状体通路退变的治疗策略

在高剂量病毒诱导的急性模型中，FTY720虽降低T细胞浸润但未保护神经通路。而当采用低剂量病毒建立慢性模型时，FTY720治疗不仅改善运动行为，还显著增加SNpc区TH⁺神经元数量，且特异性减少CD4⁺ T细胞浸润。

XPro1595对AAV9-Syn诱导的黑质纹状体退变的神经保护作用

XPro1595治疗显著改善慢性模型运动功能，增加纹状体TH免疫阳性终末密度和SNpc区TH⁺神经元数量，并降低中脑CD4⁺和CD8⁺ T细胞浸润。

研究结论强调，aSyn过表达诱导的CD4⁺ T细胞Th1极化是帕金森病神经退变的关键环节。FTY720和XPro1595通过不同机制实现神经保护，且二者均能减少CD4⁺ T细胞浸润，提示免疫调节疗法在慢性神经退行性疾病中具有更宽的治疗时间窗。该研究不仅证实适应性免疫反应在帕金森病发病中的核心地位，更为临床转化提供双保险策略——已获批多发性硬化症的FTY720与处于阿尔茨海默病Ⅱ期临床试验的XPro1595，有望加速神经免疫疗法在帕金森病领域的应用进程。