精确聚合物共轭对适配体-靶标结合的影响

《Bioconjugate Chemistry》：Influence of Precise Polymer Conjugation on Aptamer-Target Binding

本研究通过生物层干涉和表面等离子共振技术，合成了10种聚合物-ATP aptamer生物杂合体，发现无论二聚体还是三聚体结构，均能有效结合ATP，证明聚合物修饰未破坏aptamer功能。

　　

本研究利用生物层干涉法（BLI）和表面等离子体共振（SPR）技术，探讨了聚合物生物偶联对ATP适配体结合特性的影响。通过自动化固相磷酰胺化学合成方法，制备了十种不同的聚合物-适配体生物杂化体。这些生物杂化大分子包含：(i) 一段DNA序列（即ATP适配体或无ATP亲和力的对照序列）；(ii) 一个或两个含有丙基、三乙二醇或五乙二醇间隔基团的合成聚磷酸二酯段；(iii) 一个生物素末端基团，以便将其固定在链霉亲和素传感器上进行BLI和SPR实验。为了评估偶联聚合物链数量对适配体-靶标结合的影响，还制备了二嵌段和三嵌段结构的生物杂化体。所有生物杂化聚合物均通过高分辨率电喷雾质谱、离子交换高效液相色谱（HPLC）和聚丙烯酰胺凝胶电泳进行了表征。这些方法均证实了目标生物杂化体的形成。此外，BLI和SPR实验表明，所有含有ATP适配体序列的生物杂化大分子均能结合ATP，说明即使聚合物偶联位于两个合成链之间，也不会影响适配体的功能。