内在microRNA-10a通过协调转录、代谢和上皮修复途径，限制调节性T细胞的抑制功能及肠道修复过程

《Advanced Science》：Intrinsic MicroRNA-10a Restricts Regulatory T Cell Suppressive Function and Intestinal Repair by Coordinating Transcriptional, Metabolic, and Epithelial Repair Pathways

miR-10a通过调控代谢重编程（靶向Uqcrq）和肠屏障修复（靶向Areg）负向调节调节性T细胞（Tregs）的抑制功能，同时不影响Treg稳定性与分化。研究发现miR-10a缺乏的Tregs在抑制肠道炎症、调节线粒体氧化磷酸化和促进肠上皮修复中更具活性，为炎症性肠病（IBD）治疗提供了新靶点。

　　在人体免疫系统中，调节性T细胞（Tregs）发挥着至关重要的作用，它们不仅能够维持免疫稳态，还能有效抑制过度的炎症反应，尤其是在肠道等黏膜组织中。Tregs通过产生转化生长因子β（TGFβ）和白细胞介素10（IL-10）等细胞因子，限制效应T细胞的增殖和活性，从而防止免疫介导的炎症。近年来，尽管许多研究关注Tregs的分化与功能的正向调控因子，但对于那些抑制Tregs转录和代谢程序的负向调控机制，理解仍显不足。本文探讨了miR-10a在Treg功能中的关键负向调控作用，并揭示了其与肠道上皮细胞之间的相互作用，为炎症性肠病（IBD）的治疗提供了新的思路。

miR-10a是一种短的非编码RNA，属于微小RNA（miRNA）家族，具有调节基因表达的潜力。miRNA通常通过与靶基因的3'非翻译区（3'UTR）结合，影响其表达水平。研究发现，miR-10a在Tregs中高度表达，且其缺失会导致Tregs功能增强，尤其是在抑制肠道炎症方面表现出更强的能力。然而，令人惊讶的是，miR-10a的缺失并未影响Tregs的稳定性或分化能力，这表明miR-10a在调控Treg功能时，其作用可能更侧重于特定的代谢和转录调控机制。

研究团队通过构建Treg特异性miR-10a敲除小鼠模型，观察到这些小鼠在面对炎症刺激时，表现出较轻的肠道炎症。进一步的实验表明，miR-10a缺失的Tregs在体外和体内均表现出更强的抑制能力，能够更有效地抑制效应T细胞的增殖。这一发现表明，miR-10a可能通过抑制某些关键基因的表达，间接调控Tregs的活性。例如，通过单细胞和整体转录组分析，研究发现miR-10a的缺失促进了效应Treg（eTreg）表型的形成，这一表型特征包括Blimp1的表达升高，而Blimp1是miR-10a的直接靶标。这种表型变化意味着miR-10a可能通过抑制Blimp1的表达，来降低Tregs的抑制能力。

此外，miR-10a还通过调控线粒体氧化磷酸化（OXPHOS）间接影响Tregs的功能。研究中，miR-10a的缺失导致线粒体呼吸链中Uqcrq基因的表达增加，而Uqcrq是线粒体复合体III的一个组成部分，对线粒体氧化过程至关重要。实验表明，Uqcrq的缺失会削弱Tregs的抑制能力，而miR-10a的缺失则增强了这一功能。这说明miR-10a通过调控线粒体代谢，间接影响Tregs的抑制能力。然而，miR-10a的缺失并未影响Tregs的稳定性，这表明线粒体代谢和Treg稳定性可能是由不同的分子机制调控的。

在肠道屏障功能方面，miR-10a的缺失还通过调控另一个靶标——amphiregulin（Areg）影响Tregs的功能。Areg是一种表皮生长因子（EGF）家族成员，对于黏膜上皮的修复至关重要。实验中发现，miR-10a的缺失导致Areg的表达增加，而Areg的缺失则削弱了Tregs对肠道屏障功能的促进作用。这意味着miR-10a可能通过抑制Areg的表达，限制Tregs在肠道屏障修复中的作用。然而，miR-10a缺失的Tregs在肠道中的屏障功能反而得到了增强，这表明Areg在Tregs中可能具有双重作用，既参与修复，又在某些情况下抑制其功能。

研究还发现，miR-10a对Tregs的调控具有特定的细胞亚群偏好性。通过单细胞RNA测序分析，研究团队将Tregs分为三种不同的亚群：中央Treg（cTreg）、效应Treg（eTreg）以及非淋巴组织（NLT）样Treg。miR-10a的缺失主要影响eTreg和NLT样Treg，使得这些亚群的表达水平显著增加，而cTreg的表达则有所减少。这提示miR-10a可能在特定的Treg亚群中发挥更显著的调控作用。例如，eTreg通常具有更强的抑制能力，而miR-10a的缺失可能通过促进eTreg的分化，间接增强其抑制功能。

此外，研究还探讨了miR-10a调控Tregs功能的潜在机制。通过双荧光素酶实验，研究团队验证了miR-10a对Prdm1、Uqcrq和Areg的直接调控作用。Prdm1编码Blimp1，而Blimp1在Tregs中被发现是抑制功能的关键因子。Uqcrq是线粒体复合体III的一个亚基，其表达变化影响线粒体氧化过程，从而影响Tregs的代谢状态。Areg则通过促进肠道上皮细胞的修复，影响肠道屏障的完整性。这些发现揭示了miR-10a在Tregs功能调控中的多方面作用，包括转录调控、代谢调控以及与上皮细胞的交互作用。

在临床应用方面，miR-10a的调控机制为IBD的治疗提供了新的可能性。当前，针对Tregs的治疗策略主要集中在增强其抑制能力，而miR-10a的缺失却表现出增强Tregs功能的效果。这表明，通过抑制miR-10a，可能能够增强Tregs的抑制能力，从而在IBD等炎症性疾病中发挥治疗作用。然而，这一思路仍需在人体中进一步验证，尤其是在Tregs的表达水平和其在不同炎症状态下的调控作用方面。

此外，研究还发现，miR-10a的调控作用可能具有细胞类型特异性。例如，在Tregs中，miR-10a的缺失影响了线粒体代谢和Areg的表达，但在其他免疫细胞中，miR-10a的调控作用可能不同。这提示在设计基于miR-10a的治疗策略时，需要考虑其在不同细胞类型中的表达模式和调控机制，以避免可能的副作用。

研究中使用的实验方法包括多种先进的技术，如单细胞RNA测序、双荧光素酶报告基因实验、线粒体功能分析等。这些技术帮助研究团队从多个层面解析miR-10a在Tregs中的作用。例如，通过单细胞测序，研究团队能够识别不同Treg亚群的基因表达特征，并进一步分析miR-10a缺失对这些亚群的影响。通过双荧光素酶实验，研究团队验证了miR-10a对Prdm1、Uqcrq和Areg的直接调控作用，为miR-10a在Tregs功能调控中的作用提供了分子层面的证据。

线粒体功能的评估通过氧消耗率（OCR）测定和ATP水平检测完成。这些实验表明，miR-10a的缺失会增强线粒体的氧化能力，从而提高Tregs的抑制功能。然而，这一增强作用并不影响Tregs的稳定性，说明Tregs的分化和功能可能由不同的分子机制调控。

总的来说，这项研究揭示了miR-10a在Tregs功能调控中的复杂作用。它不仅通过调控Blimp1、Uqcrq和Areg等关键分子，影响Tregs的抑制能力、代谢状态和肠道屏障功能，还通过与肠道上皮细胞的相互作用，进一步调控其在肠道环境中的功能。这些发现不仅加深了我们对Tregs调控机制的理解，也为IBD等炎症性疾病的治疗提供了新的思路。未来的研究可以进一步探索miR-10a在人类Tregs中的表达模式，以及其在不同疾病状态下的调控作用，从而为开发基于miR-10a的治疗策略奠定基础。