纳米酶联免疫吸附测定：动力学视角

《Langmuir》：Nanozyme-Linked Immunosorbent Assays: A Kinetic Perspective

纳米酶作为过氧化物酶替代物的应用在酶联免疫吸附试验（ELISA）中推动了纳米酶联免疫吸附试验（NLISA）的发展，但需注意酶与纳米酶的催化动力学差异。本研究通过核心@壳Au@Pt和Au@Pd纳米酶，发现壳层厚度显著影响Michaelis-Menten常数，并首次证实POD样活性在pH-0.56的超低酸性环境中仍保持高稳定性，据此提出新型催化终止策略，使NLISA检测灵敏度提升一个数量级并降低背景干扰。

　　

具有过氧化物酶活性（POD活性）的纳米酶越来越多地被用作各种检测中辣根过氧化物酶的功能替代品。特别是在酶联免疫吸附测定（ELISA）中的应用，促使了纳米酶联免疫吸附测定（NLISA）的发展。NLISA遵循成熟的ELISA程序，并已应用于多种纳米酶和分析物。然而，大多数研究忽视了酶催化与纳米酶催化之间的根本差异，这往往导致在动力学受限条件下使用非最优的实验方案。在本研究中，我们使用core@shell Au@Pt和Au@Pd结构的类过氧化物酶纳米酶，发现其米氏常数会随着壳层厚度的变化而显著改变。此外，我们首次观察到这类纳米酶在极低pH值（低至-0.56）下仍保持异常高的活性稳定性。这一独特特性使我们能够提出新的策略来终止催化反应。总之，研究表明，充分考虑纳米酶的催化特性有助于开发出灵敏度提高一个数量级且背景噪声最小化的NLISA实验方案。