在柱后对标记的消旋手性选择剂进行灌注，可实现液相色谱-手性质谱/质谱联用（LC-Chiral MS/MS）

LC-MS/MS结合后柱 infused（PCI）和Cu2+标记手性剂实现复杂基质中手性选择器筛选、手性识别及ee测定，通过三聚体离子差异化解离实现手性分析，并应用于中药根茎的手性代谢组学研究。

　　

本文致力于开发一种能够同时满足三种需求的分析方法：利用手性质谱（MS/MS）与液相色谱（LC）联用技术来分析复杂样品，具体包括手性识别、手性选择剂（CS）筛选以及对映体过量比（ee）的测定。在Cu²⁺存在下，标记的dl-Phe（d-Phe/l-Phe-d₅ = 1:1）通过柱后注入（PCI）方式被引入到LC洗脱液中。这种复合作用使得对映体（即d/l-A）转化为非对映体三聚体离子，例如[Cu^II(d/l-A)d-Phe)₂ – H]⁺、[Cu^II(d/l-A)l-Phe-d₅)₂ – H]⁺和[Cu^II(d/l-A)d-Phe)l-Phe-d₅) – H]⁺，这些三聚体离子与二聚体离子具有不同的解离动力学特性，从而实现了手性MS/MS分析。通过对角型吡喃香豆素（AP）对映体在Peucedani Radix（PR）中的手性识别，通过构建全碰撞能量斜坡（FCER）-MS²谱图，并将最大相对离子强度（RII_max）值与热焓特征相关联，成功实现了手性识别。在CS筛选过程中，通过满足两个前提条件（即生成所需的三聚体离子和不同的解离行为），从PR中捕获了15种AP。通过使用一种选择性AP作为CS，可以通过线性转换[Cu^II(d/l-AA)d-Pte) – H]⁺与[Cu^{II(d/l-AA)₂ – H]+的响应比来同时测定茶样品中氨基酸的对映体过量比（ee）。对于13批PR样本，通过同时测定五种d/l-AP的对映体过量比，开展了手性代谢组学和常规广泛靶向代谢组学研究，其中对映体而非混合物作为差异变量进行分析。综上所述，通过使用标记的外消旋CS（例如标记的dl-Phe）结合PCI-LC-MS/MS技术，实现了“一石三鸟”的目标，即在缺乏代谢物功能基团的情况下也能进行高效的手性代谢组学分析。}