通过GRID1/谷氨酸受体δ-1和CBLN1/小脑素-1的突触间信号传递，可以促进中枢杏仁核中的自噬过程，并防止慢性疼痛的发生

中央杏仁核（CeA）是脊髓-脑桥-杏仁核痛觉通路的一部分，其神经可塑性变化与慢性疼痛的发展有关。研究发现，GRID1/GluD1和CBLN1在炎症和神经性疼痛模型中下调，并调控多个脑区的自噬。通过使用GRID1 C端衍生肽Tat-HRSPN，证实GRID1直接促进自噬并减少AMPA受体表达，从而抑制疼痛。这些结果揭示了一种新的GRID1/GluD1依赖的跨突触自噬机制，其缺陷可能导致慢性疼痛。

　　

摘要

中央杏仁核（CeA）是脊髓-旁杏仁核痛觉通路的重要组成部分。该通路中的神经可塑性变化，如细胞兴奋性的增加和兴奋性神经传递的增强，在慢性疼痛的发展和持续中起着关键作用。然而，中央杏仁核中神经可塑性变化的潜在机制仍不完全清楚。我们最近发现，在炎症性和神经病理性疼痛模型中，GRID1/GluD1（谷氨酸离子型受体δ亚单位1）及其结合伙伴CBLN1（小脑素1前体）的表达下调。此外，我们还发现GRID1-CBLN1信号通路调控了多个脑区的自噬过程。在本研究中，我们利用炎症性和神经病理性疼痛模型探讨了GRID1-CBLN1表达下调、自噬功能障碍与继发性痛觉过敏之间的因果关系。在疼痛状态下，GRID1和CBLN1的表达下调伴随着神经可塑性变化，表现为兴奋性神经传递增强以及AMPA受体（AMPAR）表达的增加。同时，观察到BECN1表达显著下调，而SQSTM1和MAP1LC3B表达上调，表明自噬过程受到抑制。这些变化似乎具有细胞类型特异性，因为BECN1和LAMP1（自噬体的标志物）在GRID1优先表达的PRKCD⁺神经元中的分布更为密集。通过使用GRID1 C末端衍生的肽（Tat-HRSPN），我们证明GRID1可以直接促进自噬，并在正常动物中降低AMPAR的表达。这种效应可能是由于GRID1与自噬相关因子（如nGOPC/nPIST、BECN1和LAMP1）的直接相互作用所致。综上所述，这些研究揭示了一种新的GRID1/GluD1依赖的跨突触自噬机制，其缺陷可能是慢性疼痛的发病机制。

缩写说明：aCSF：人工脑脊液；AMPARs：α-氨基-3-羟基-5-甲基-4-异噁唑丙酸受体；ATG：自噬相关蛋白；BAPTA：1,2-双(邻氨基苯氧基)乙烷-N,N,N′,N′-四乙酸；BECN1：beclin 1；CBLN1：小脑素1前体；CeA：中央杏仁核；CFA：完全弗氏佐剂；CRH/CRF：促肾上腺皮质激素释放激素；CTD：羧基末端结构域；DHPG：二羟基苯基甘氨酸；GOPC/PIST：高尔基体相关PDZ结构域及卷曲螺旋结构域；GRID1/GluD1：谷氨酸离子型受体δ亚单位1；GRIN/NMDAR：谷氨酸离子型受体NMDA亚型；iGluRs：离子型谷氨酸受体；KO：基因敲除；LA/BLA：外侧杏仁核/基底外侧杏仁核；LAMP1：溶酶体相关膜蛋白1；LTD：长期抑制；MAP1LC3：微管相关蛋白1轻链3；mEPSCs：微小兴奋性突触后电流；GRM：谷氨酸代谢型受体；MTOR：雷帕霉素激酶的靶蛋白；nGOPC/nPIST：神经元来源的GOPC/PIST；NRXN1a：神经连接蛋白1α；PB：旁杏仁核；PBS：磷酸盐缓冲盐水；PB-CeLC：旁杏仁核-中央杏仁核外侧结构；PI3K：磷脂酰肌醇3-激酶；PRKCD+: 蛋白激酶Cδ阳性；rCBLN1：重组CBLN1；SDS-PAGE：十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳；SQSTM1：自噬体结合蛋白1；SNL：脊髓神经结扎；SST+: 生长抑素阳性；TBD11：Tat-beclin 1 D11；TBST：含吐温20的三缓冲盐水；WT：野生型。