从海胆Echinometra mathaei中分离体腔细胞：培养条件的优化

《In Vitro Cellular & Developmental Biology - Animal》：Isolation of coelomocyte from sea urchin Echinometra mathaei: optimization of culture condition

研究旨在建立波斯湾海月水母共腔细胞长期体外培养体系，通过优化培养基、生长补充剂及物理条件，发现HCCM培养基辅以共腔液最佳，支持细胞生长与色素产生。成果为海月水母免疫学及细胞生物学研究奠定基础。

　　

摘要

水产养殖业的快速发展受到海洋无脊椎动物传染病的阻碍，这些疾病导致了经济损失。海洋无脊椎动物细胞培养为评估不同条件下的生物特性和细胞反应提供了工具。长期培养的目的是分离出组织特异性细胞，并从干细胞中鉴定生物活性化合物。Echinometra mathaei（又称波斯湾海胆）在多个领域具有广泛应用价值，包括水产养殖、胚胎学和进化生物学。然而，其细胞培养面临诸多挑战，主要是由于微环境特征不明确以及特定的培养要求难以满足。本研究旨在建立并优化来自E. mathaei的体腔细胞的长期培养方法，重点关注微环境条件的优化，以克服当前海洋无脊椎动物细胞培养的局限性。从伊朗波斯湾的Lark Island采集E. mathaei样本后，将其适应人工海水环境，然后从体腔液、体腔上皮和轴向器官等不同来源分离出体腔细胞。通过测试多种细胞分离方法、培养基、生长补充剂、培养皿和物理条件，确定了体腔细胞体外培养的最佳条件。此外，将体腔细胞分化为产色素细胞，并利用分光光度法提取和鉴定出萘醌类色素。显微镜观察发现了几种类型的体腔细胞，包括花瓣状细胞、丝状细胞、振动细胞和球形细胞。添加了体腔液的HCCM培养基对细胞生长和存活率最为有效；同时，体腔液也是将体腔细胞分化为产萘醌色素细胞的最佳培养基。这些发现有助于开发海胆的体外细胞培养方法，为进一步研究海胆免疫学、细胞生物学以及细胞对病原体和其他生物压力的反应奠定基础。