通过优化发酵条件提高源自豆豉的枯草芽孢杆菌natto NK11的纳豆激酶产量，并评估其溶栓活性

《Antonie van Leeuwenhoek》：Enhanced nattokinase production by optimized fermentation conditions of douchi-derived Bacillus subtilis natto NK11 and evaluation of its thrombolytic activity

本研究从传统发酵大豆制品中分离鉴定出产纳豆激酶菌株Bacillus subtilis NK11，通过正交实验优化发酵条件（pH 6.0，接种量3%，36℃培养72 h），获得最高酶活性1874.94±77.34 IU/mL（较未优化提升26%），并证实其具有蛋白酶活性和显著的体外溶栓活性，为工业化生产奠定基础。

　　

摘要

纳豆激酶因其显著的纤维蛋白溶解活性而被认为在预防和治疗血栓栓塞性疾病方面具有有效性，因此在制药和功能性食品领域展现出巨大的应用潜力。本研究从传统的发酵大豆产品中分离并鉴定了产生纳豆激酶的菌株。通过正交实验优化了发酵条件，并通过SDS-PAGE、酶谱分析和体外血栓溶解试验对粗酶进行了表征。结果表明，从发酵的豆豉中分离并鉴定出一种枯草芽孢杆菌 NK11菌株。最佳发酵条件确定为初始pH值为6.0、接种浓度为3%，以及在36℃下发酵72小时。这些条件下的酶产量和活性最高（1874.94 ± 77.34 IU/mL），比未优化条件下的活性提高了1.26倍。SDS-PAGE分析显示，粗酶的分子量约为27 kDa，发酵上清液中的蛋白质种类有限，纳豆激酶为主要成分，这有利于后续的纯化过程。酶谱分析和血栓溶解试验表明，该粗酶具有蛋白水解活性，并在体外表现出显著的血栓溶解活性。这些结果为使用枯草芽孢杆菌 NK11生产纳豆激酶及其进一步应用奠定了基础。