放射治疗通过miR-616-3p调控PTEN/PI3K/AKT信号通路，从而促进肺癌细胞来源的外泌体中巨噬细胞的M2极化

《In Vitro Cellular & Developmental Biology - Animal》：Radiotherapy promotes M2 polarization of macrophages through the regulation of the PTEN/PI3K/AKT signaling pathway through miR-616-3p in lung cancer cell-derived exosomes

研究揭示，IR诱导的NSCLC细胞分泌的外泌体miR-616-3p通过抑制PTEN并激活PI3K/AKT通路，促进巨噬细胞M2极化，加剧NSCLC放射治疗抵抗。

　　

摘要

放射治疗（RT）在非小细胞肺癌（NSCLC）的治疗中面临重大挑战。尽管已有研究探讨了肿瘤来源的外泌体（Exo）miRNAs如何影响肿瘤对RT的耐药性以及巨噬细胞的M2极化，但含有miR-616-3p的外泌体如何调节巨噬细胞极化从而影响NSCLC的RT耐药性的具体机制仍不清楚。本研究的目的是探讨RT通过NSCLC细胞释放的miR-616-3p外泌体来调节巨噬细胞M2极化的分子机制。外泌体的鉴定采用了透射电子显微镜（TEM）和纳米粒子追踪分析（NTA）技术。流式细胞术、免疫荧光和ELISA用于验证巨噬细胞的表型。通过RT-qPCR检测miR-616-3p的表达情况，并通过双荧光素酶报告基因实验和RIP鉴定确认miR-616-3p与PTEN之间的靶标关系。在NSCLC中，miR-616-3p的表达水平较高，并与巨噬细胞的RT耐药性和M2极化相关。后续研究表明，RT会促进NSCLC细胞释放含有miR-616-3p的外泌体进入巨噬细胞。H1299肺癌细胞系和M0巨噬细胞进行了共培养实验。结果发现，RT和含有miR-616-3p的外泌体可增加巨噬细胞中CD163+CD206+阳性细胞的比例，同时提高Arg1、IL-10、TGF-β1和VEGF的水平，从而增强巨噬细胞的M2极化。在分子机制方面，miR-616-3p抑制PTEN蛋白的表达，同时上调p-PI3K/PI3K和p-AKT/AKT的水平；无论是增强PTEN还是抑制PI3K，都可能显著减弱电离辐射（IR）的影响，从而抑制NSCLC细胞外泌体对巨噬细胞M2极化的作用。本研究揭示，在受到IR诱导的NSCLC细胞中，含有miR-616-3p的外泌体会降低PTEN水平，增强PI3K/AKT信号通路，导致巨噬细胞M2极化增加，进而加重NSCLC的进展。