改进的全自动干血斑样本制备系统及其在类固醇酯检测中的应用

《Analytical Chemistry》：Modified Fully Automated Dried Blood Spot Sample Preparation System and Its Application in Steroid Ester Detection

检测类固醇的自动化干血斑处理及高效筛查方法优化。通过引入独立脱附泵优化样本流动路径，结合HPLC-HRMS建立30种类固醇酯的高灵敏筛查（LOD低至0.05 ng/mL）与26个目标的确认方法，验证其重复性（RSD<15%）及实用性，为反兴奋剂检测提供高效解决方案。

　　

检测合成代谢雄激素类固醇（AAS）在反兴奋剂工作中仍然是一个重大挑战，尤其是在区分内源性类固醇和其合成对应物时。尽管同位素比值质谱法（IRMS）是一种常用的确认方法，但其复杂性、对高精度设备的需求以及容易受到药物配方、饮食和环境因素干扰的特点限制了其实际应用。近年来，直接检测干血斑（DBS）中的类固醇酯已成为一种简单高效的补充方法。然而，传统的DBS处理过程劳动强度大，现有的全自动系统通常遵循固定的工作流程，缺乏灵活性，因此无法满足多目标检测所需的高灵敏度要求。在这项研究中，我们通过引入一个独立的解吸泵来优化现有的全自动DBS处理系统，从而改善了样品流动路径。基于这一优化系统，我们开发了一种用于检测30种类固醇酯的高通量筛选方法以及一种用于检测26个目标物的确认方法，该方法采用了高效液相色谱-高分辨率质谱法（HPLC-HRMS）。方法验证表明，该方法实现了较低的检测限（大多数物质低至0.05 ng/mL）和良好的重现性（RSD < 15%）。此外，盲样测试、给药研究以及与传统IRMS方法的比较验证了我们方法的实际性能。总体而言，本研究建立了一种高效且灵敏的自动化DBS分析方法，为类固醇酯及其他兴奋剂的筛查和确认提供了可行的技术解决方案。