基于高通量无标记定量蛋白质组学探索电脉冲联合二甲双胍调控三阴性乳腺癌潜在治疗靶点的研究

《Bioelectrochemistry》：Investigations of potential therapeutic targets from high-throughput, label-free, quantitative proteomic studies in MDA-MB-468 cells treated with metformin and electrical pulses

本文采用高通量无标记定量蛋白质组学技术，结合细胞活力与活性氧（ROS）检测，深入探究了电脉冲（EP）联合二甲双胍（Met）处理MDA-MB-468三阴性乳腺癌（TNBC）细胞的分子机制。研究发现EP+Met组合疗法能显著抑制细胞活力（降至25.6%）、提升ROS水平（至179%），并筛选出125个上调与37个下调蛋白。研究首次提出LRCH4（上调）与GNS（下调）作为潜在新型治疗靶点，其作用与抑制mTOR/PI3K/Akt通路、遏制肿瘤增殖与转移密切相关，为TNBC的靶向治疗提供了新思路。

　　

Highlight

MDA-MB-468三阴性乳腺癌细胞系

MDA-MB-468细胞系是一种人源三阴性乳腺癌（TNBC）细胞系，分离自一位51岁患有转移性乳腺腺癌的黑人女性患者，购自美国典型培养物保藏中心（ATCC，货号HTB-132?）。细胞在37°C、85%相对湿度、5% CO₂的湿润环境中，使用DMEM培养基（购自Gibco公司，美国）进行培养，培养基中补充了10%的胎牛血清（FBS，购自Phoenix Scientific公司）和1%的青霉素-链霉素溶液（每毫升含10,000单位青霉素和10毫克链霉素，购自Sigma-Aldrich公司）。在...

细胞活力与活性氧（ROS）研究

图2显示了不同处理条件下的各种细胞研究结果。图2a展示了MDA-MB-468细胞在0.25、0.5、1、2和5 mM二甲双胍浓度下的剂量反应曲线。在0.25 mM和0.5 mM浓度下，细胞活力分别为82.00%和70.00%（对照组为100%）。在1 mM浓度时，细胞活力降至48.00%（接近IC₅₀值）。当浓度增加至5 mM时，细胞活力下降至25.00%，表明二甲双胍对TNBC细胞具有显著的细胞毒性作用。

讨论

在本研究中，我们首次对经电脉冲（EP）联合二甲双胍（Met）处理的人源TNBC细胞MDA-MB-468进行了高通量、无标记定量蛋白质组学研究，并同步测量了细胞活性和活性氧（ROS）水平。检测到的125个上调蛋白和37个下调蛋白表明，这些蛋白质通过复杂且多样的相互作用方式导致细胞死亡或趋向于死亡，这与细胞活力（低至25.60%）和ROS（高达179%）的结果很好地相互印证。我们观察到...

作者贡献声明

Praveen Sahu: 负责文稿的审阅与编辑、初稿撰写、可视化、方法论、形式分析、数据整理、概念化。

Ignacio G. Camarillo: 负责初稿撰写、指导监督、资源提供、方法论。

Raji Sundararajan: 负责初稿撰写、验证、指导监督、资源提供、方法论、形式分析、概念化。

利益冲突声明

作者声明，他们没有已知的、可能影响本研究报告结果的竞争性财务利益或个人关系。

致谢

所有的液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）数据均通过普渡大学Discovery Park内的普渡蛋白质组学中心获取。我们也非常感谢审稿人和编辑提出的富有见地的反馈。