基于CRISPR响应性DNA纳米花的非洲猪瘟电化学早期诊断性能提升

《Analytical Chemistry》：Enhancing Performance in Electrochemical Early Diagnosis of African Swine Fever Based on CRISPR-Responsive DNA Nanoflowers

基于CRISPR-Cas12a和信号放大技术的电化学生物传感器用于高灵敏度非洲猪瘟病毒（ASFV）DNA检测，通过环介导扩增（RCA）制备DNA纳米花（DNFs），检测限达3.57 aM，性能优异。

　　

准确、超灵敏且快速的非洲猪瘟病毒（ASFV）检测方法能够有效防止其传播并减少损失。本文设计了一种电化学生物传感器，通过结合CRISPR技术和信号放大技术实现对ASFV DNA的高性能检测。多孔DNA纳米花（DNFs）通过滚环扩增（RCA）制备，并预先与Cas12a-crRNA复合物结合，以提高检测灵敏度、缩短检测时间并简化检测步骤。在ASFV DNA存在的情况下，Cas12a的切割活性被激活，将DNFs降解为DNA片段并引发显著的电化学信号变化。与传统RCA扩增生物传感器（检测限为2.90 fM）相比，该生物传感器的检测限（3.57 aM）低了3个数量级。此外，所设计的电化学生物传感器具有优异的重现性、储存稳定性和实际分析能力，表明其在非洲猪瘟（ASF）的早期诊断中具有广阔的应用前景。