鲑鱼上皮细胞系中Myd88基因缺失揭示其在细菌识别与免疫应答中的关键作用

《Cell and Tissue Research》：Disruption of Myd88 in a salmonid epithelioid cell line reveals its contribution to bacterial detection and immune response

本研究针对鱼类Toll样受体(TLR)信号通路机制不明确的问题，研究人员通过CRISPR/Cas9技术构建myd88基因敲除的鲑鱼上皮细胞系MYD88C2，发现MyD88介导了zymosan和flagellin诱导的促炎反应，但对多种鱼类病毒复制无影响，为鱼类免疫通路研究提供了重要模型。

　　

Toll样受体(TLR)作为一类模式识别受体，能够识别病原相关分子模式(PAMP)和损伤相关分子模式(DAMP)，进而启动免疫应答。TLR会选择性招募不同的衔接蛋白分子，其中髓样分化初级反应蛋白88(MyD88)可介导除TLR3之外所有TLR的下游信号传导。

为探究鱼类TLR信号通路，研究团队采用CRISPR/Cas9基因组编辑技术，成功构建了命名为MYD88C2的myd88基因敲除克隆上皮样鱼细胞系。通过基因表达谱分析和报告基因检测手段，研究人员在热灭活弧菌(Vibrio anguillarum)、热灭活大肠杆菌(Escherichia coli)、鞭毛蛋白(flagellin)、酵母聚糖(zymosan)刺激以及多种病毒接种的实验条件下，系统比较了该细胞系与野生型细胞系的表型差异。

研究结果表明，通过促炎基因诱导程度评估，MYD88C2细胞系对zymosan和flagellin的促炎反应显著减弱。值得注意的是，通过转染myd88表达质粒可部分恢复该细胞系对zymosan的反应性。相反地，myd88基因的缺失并未影响病毒性出血性败血症病毒(VHSV)、传染性造血器官坏死病毒(IHNV)、传染性胰腺坏死病毒(IPNV)、鲤鱼春病毒血症病毒(SVCV)或传染性鲑鱼贫血病毒(ISAV)复制相关的细胞病变效应。

这些发现凸显了MyD88在介导细菌和真菌刺激特异性促炎反应中的核心作用，同时表明在实验条件下，该基因的缺失对上皮样鱼细胞中病毒复制或细胞致病性未产生可检测的影响。