将CRISPR/Cas12a与微流控系统结合，可增强对非小细胞肺癌患者循环肿瘤细胞中Programmed Cell Death Ligand 1（PDCD1）表达的分析

《ACS Sensors》：CRISPR/Cas12a Integrated with a Microfluidic System Enhanced Analysis of Programmed Cell Death Ligand 1 Expression in Circulating Tumor Cells from Non-Small Cell Lung Cancer Patients

开发了一种双模式微流控芯片，结合CRISPR/Cas12a定量和免疫荧光可视化，用于高灵敏度检测PD-L1阳性循环肿瘤细胞，实时评估非小细胞肺癌患者免疫治疗疗效，助力预后监测。

　　

在外周血中检测程序性细胞死亡配体1（PD-L1）阳性的循环肿瘤细胞（CTCs）对于预测和评估非小细胞肺癌（NSCLC）患者免疫治疗的效果具有重要的临床价值。然而，传统方法受灵敏度较低的限制，精确量化仍是一个挑战。本文构建了一种双模式微流控分析芯片，该芯片结合了规律间隔短回文重复序列/Cas12a定量技术和免疫荧光可视化技术。通过扩增核酸靶标，即使在目标细胞数量非常少的情况下，也能选择性和灵敏地定量CTCs表面的PD-L1蛋白（浓度为20至10^7个细胞/毫升），从而产生强烈的荧光信号。该系统能够有效检测NSCLC患者外周血样本中的PD-L1+ CTCs表达，并实时监测PD-1/PD-L1靶向免疫检查点抑制剂的治疗效果。在监测NSCLC患者的预后方面，该系统表现出优异的临床应用性能。