原发性免疫缺陷病新型致病性变异的功能验证与临床意义研究

《European Journal of Immunology》：Identification and Functional Validation of Novel Pathogenic Variants in Primary Immunodeficiencies

本研究针对原发性免疫缺陷病（PIDs）中遗传变异致病性不明确的诊断难题，通过全外显子组测序技术，在6个家族中鉴定出5个新型PID相关基因变异（包括FCHO1、NCF2、STAT1及LRBA），并采用CRISPR基因组编辑、pSTAT1检测及DHR实验等功能验证方法，证实了其致病机制，为PID精准诊断与治疗提供了新依据。

　　

原发性免疫缺陷疾病（Primary Immunodeficiency Diseases, PIDs）是一类由基因缺陷导致免疫功能异常的遗传性疾病，患者常表现为反复感染、自身免疫异常及恶性肿瘤风险增高。由于许多PIDS的致病基因未明，尤其罕见变异的致病性难以判定，临床诊断面临巨大挑战。新一代测序（Next-Generation Sequencing, NGS）技术的应用为识别PID相关分子缺陷提供了有效手段，而变异的功能验证则是确认其临床意义的关键环节。本研究通过全外显子组测序在六个家系中发现了五个新型PID相关基因变异，包括FCHO1（E44K）、NCF2（A206P）、NCF2（c.174+1G>A）、STAT1（L199F）以及LRBA基因第9–17外显子的拷贝数缺失。其中四项变异进一步通过功能实验验证：STAT1（L199F）采用pSTAT1磷酸化检测，NCF2（A206P与c.174+1G>A）通过二氢罗丹明123（Dihydrohodamine 123, DHR）氧化爆发实验评估，FCHO1（E44K）则利用CRISPR介导的基因组编辑技术进行研究。本研究拓展了对PID未报道变异致病机制的认识，为相关疾病的基因诊断和靶向干预提供了科学依据。