可诱导CRISPR–Cas9筛选平台在非增殖细胞状态研究中的创新应用

来自某研究团队的研究人员开发了一种可诱导CRISPR–Cas9筛选平台，用于解决非增殖细胞状态下功能缺失筛选的难题。该研究通过时序控制Cas9表达，实现了基因编辑在细胞状态稳定后的精确启动，成功鉴定了衰老细胞中的新型衰老溶解靶点，为干细胞分化、免疫发育、衰老及癌症研究提供了重要技术支撑。

　　

科学家们开发出一项突破性技术——可诱导CRISPR–Cas9（Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats–CRISPR associated protein 9）筛选平台，专门用于探索非增殖性细胞状态的神秘面纱。传统CRISPR筛选虽然在增殖细胞中效果显著，但当面对分裂停滞的细胞时，其编辑效率骤降，难以准确捕捉引导RNA（guide RNA）的"脱落"信号。

这项创新方案通过引入可诱导型Cas9系统，实现了对Cas9蛋白表达的精准时序控制。这意味着基因编辑只在目标细胞完全进入非增殖状态（如细胞衰老、分化或静息）后才会启动，有效规避了状态转换过程中的干扰。研究者详细阐述了构建诱导型Cas9细胞株的全流程，包括利用流式细胞术（flow cytometry）精确量化编辑效率，并分享了针对不同非增殖状态优化关键参数的专业技巧。

更令人兴奋的是，团队以衰老细胞（senescent cells）为模型，演示了如何通过该平台筛选能特异性清除衰老细胞的"衰老溶解靶点（senolytic targets）"。整个技术路线从构建细胞株到完成筛选分析约需8–12周，适用于具备分子生物学基础的研究人员。这项技术不仅为癌症研究开辟新路径，更在干细胞分化、免疫细胞发育及衰老研究等领域展现出广阔应用前景。