基于折叠能量调控的ProAla突变策略实现高纯度双特异性IgG样抗体的高效分泌

来自某研究团队的研究人员通过改造重链折叠能垒，开发出ProAla突变技术，利用未折叠蛋白响应通路和内质网伴侣蛋白BiP的互作机制，显著提升双特异性抗体（bsIgG）的正确配对率，分泌产物纯度大幅提高且结构功能完整，为复杂抗体疗法提供新范式。

　　

双特异性抗体（bispecific antibodies, bsAbs）能够实现单克隆抗体无法企及的治疗机制，例如双抗原靶向或受体激动。IgG样格式的双特异性抗体（bsIgG）由两条不同的重链（heavy chains）及其各自对应的轻链（light chains）组成。然而，共表达这四种不同多肽链常导致错误配对产物，这些副产物因生物物理性质相似而难以与目标bsIgG分离。

研究团队设计了一组名为ProAla的突变策略，巧妙利用细胞内的未折叠蛋白响应（unfolded protein response）通路。经ProAla改造的重链具有更高的折叠能量势垒，使得仅认知轻链与重链能共同诱导正确折叠、伴侣蛋白释放及后续分泌。ProAla Fab和Fc区结构与常规抗体完全一致，从而确保其半衰期和生物学功能得以维持。

错误配对的多肽链因与内质网伴侣蛋白BiP相互作用增强而无法分泌，最终大幅提升分泌型bsIgG的纯度。