冻干而非冷冻：从间充质基质细胞中提取的冻干外泌体及其在神经炎症模型中的治疗作用

《Journal of the Association of Nurses in AIDS Care》：Freeze-Dried, Not Frozen: Lyophilized Mesenchymal Stromal Cell-Derived Extracellular Vesicles and Therapeutic Function in Neuroinflammatory Models

MSC-EVs冻干技术对免疫调节的影响及标准化需求。比较冻干与冷冻MSC-EVs（BM/AD/UC来源）在LPS刺激的啮齿类巨噬细胞和人类PBMCs中的TNF-α抑制效果，发现小批次BM-MSC EVs冻干后仍有效，而UC/AD来源在啮齿模型中不稳定，但在人类细胞中表现一致。研究证实冻干MSC-EVs作为稳定疗法在炎症性疾病中的可行性，需标准化生产工艺和效价检测。

　　

摘要

背景：

间充质基质细胞（MSC）衍生的细胞外囊泡（EVs）为免疫调节提供了一种有前景的无细胞疗法，但其临床应用受到变异性和储存限制的阻碍。冻干技术可能使EVs具备货架稳定性，但其对生物活性的影响尚未完全明确。

研究设计：

我们使用LPS刺激的啮齿动物脾细胞和微胶质细胞模型以及人类外周血单核细胞（PBMCs），比较了来自骨髓（BM）、脂肪组织（AD）和脐带（UC）MSC的冷冻和冻干EVs的免疫调节作用。研究变量包括批次规模（小批量 vs 大批量）、细胞因子预处理以及MSC来源。TNF-α的分泌被用作炎症的标志物。

结果：

冻干的小批量BM-MSC EVs在啮齿动物脾细胞和微胶质细胞中一致性地抑制了TNF-α的分泌。大批量和经细胞因子刺激的EVs则表现出更显著的变异性。UC和AD来源的EVs在啮齿动物脾细胞中引起的效果不一致。相比之下，冻干的UC和AD来源的EVs在三种供体的人类PBMCs中均表现出可重复的TNF-α抑制作用。

结论：

冻干的MSC-EVs——尤其是来自脐带MSC的EVs——保留了免疫调节功能，并且其效果与冷冻EVs相当或更好。虽然啮齿动物模型显示了显著的变异性，但人类PBMCs显示出一致的细胞因子抑制作用。这些发现支持冻干EVs作为可扩展、货架稳定的治疗手段用于炎症和神经炎症疾病的可行性，并强调了标准化生产和效力检测的必要性。